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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 酶在80℃热水处理 变性的问题
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hellen1987

木虫 (小有名气)

[交流] 酶在80℃热水处理 变性的问题

我是研究在某一温度下蛋白质变性程度以及空间结构的变化问题，酶在80℃热水中处理5min，时间要求很精确，处理结束是应该马上放冰浴中？还是放4℃冰箱中降温？
想要有速度的话肯定是冰浴快，但是在高温下马上再低温处理，蛋白质结构会不会生改变？而如果4℃降温，肯定很慢，这样又会发生时间依赖性酶活性的丧失。。。
不知大家试验中会如何处理这个问题？刚开始做实验，请多加指教~·~
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1楼 2011-11-29 19:21:52
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★
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hellen1987(金币+5): 恩 谢谢 马上检测确实不容易 现在我是觉得放在化了的冰水里可能比较现实 2011-12-01 09:06:24
个人认为，如果可能，最好高温处理之后马上检测。
本人外行，权当顶贴吧~
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2楼2011-11-29 23:33:45
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神以灵

木虫 (正式写手)
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西瓜(金币+1): good 2011-11-30 04:08:43
hellen1987(金币+5): 是应该再看一些影响蛋白质构象相关的文献 谢谢了！ 2011-12-01 09:08:12
测定温度一定要室温吗
如果一定要室温
那两种都试一下 看看结果差多少
我也没搞过
不敢说
你可以查一下文献
看看冰水浴是否真的会产生你说的那种负面效果
因为不同的酶应该不一样

[ Last edited by 神以灵 on 2011-11-29 at 23:58 ]
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3楼2011-11-29 23:57:11
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547star

木虫 (著名写手)
★
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hellen1987(金币+10): 恩 谢谢 很有启发 2011-12-06 08:45:58
立即冰水浴吧,放冰箱的做法,别人重复不了,谁知道你的冰箱距离水浴锅多远!精确是相对而言的,能精确的是放到80度水浴的时间.放入前是在冰浴还是室温,可以写.达到80度是需要时间的,跟样品的温度,体积和试管的材质厚度有一定影响.试验的做法和描述只要更方便别人理解和重复你的试验就可以了.
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5楼2011-12-03 09:38:55
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547star

木虫 (著名写手)
★
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补充一下,因为要测构象变化,这方面不懂.建议仔细阅读参考文献,看明白别人怎么做,在充分理解的情况下,然后自己照着做,条件不具备的,才适当的修改.
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6楼2011-12-06 09:34:50
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shuangzi8761

银虫 (著名写手)
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西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-12-07 18:49:33
建议直接冰浴 之前也有冰浴还是冰箱的困惑 不过你看任何的使用指南 没有说放冰箱的吧 都是冰浴。。。。。。
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7楼2011-12-06 09:49:59
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hellen1987

木虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 547star at 2011-12-03 09:38:55:
立即冰水浴吧,放冰箱的做法,别人重复不了,谁知道你的冰箱距离水浴锅多远!精确是相对而言的,能精确的是放到80度水浴的时间.放入前是在冰浴还是室温,可以写.达到80度是需要时间的,跟样品的温度,体积和试管的材质厚度 ...

恩 后来 同学讲了一句话 很对 低温变性是可以恢复的 高温不可以 所以冰浴应该是最佳选择  另外 六楼讲的也很对 很多试剂盒的使用说明里关于酶的液都会直接冰浴
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8楼2011-12-07 08:39:00
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shijx4楼
2011-12-02 22:17   回复  
wanhscn: 对于求助帖!不可纯表情回帖! 2011-12-02 22:20:46
wanhscn(金币+2): 不管怎么样,先鼓励新虫友回帖!下次注意,谢谢合作! 2011-12-02 22:21:59
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