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树宝宝zyx

新虫 (小有名气)

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[求助] 引物设计

我用的16SrDNA v3区通用引物，参考的文献，上下引物为
27Fb 5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'
1495Rb 5'-CTACGGCTACCTTGTTACGA-3'

PCR电泳结果显示二聚体相当多，PCR条带比较淡，之前让人看过好像是上引物有自聚，可是我不会设计引物，请问能否帮我修改下？不胜感激！

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科研真辛苦！

1楼 2011-11-25 16:05:37

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树宝宝zyx

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引用回帖:

3楼: Originally posted by shumin613 at 2011-11-25 19:39:13:
引物二聚体多有可能是引物的量加多了哦，可以适当降低用量试一下。不行就把全序列测出来在primer 5 中自动设计一下。如果打算用原来的引物的话，可以按照引物设计的基本原则改一下，分子克隆上都有基本原则说明的 ...

引物加得不多啊，我怀疑引物用来二聚体了所以使得PCR条带较弱，我想要再合成一个原来的引物的，可是我不会设计优化，能否帮我改下啊？不胜感激！