应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 如何确定未知内切酶的位点
192/2返回列表上一页12
查看: 2434  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

0624410024

金虫 (正式写手)

Begging for knowledge

【答案】应助回帖

★ ★ ★
wanhscn(金币+3): good!鼓励交流! 2011-11-27 11:18:00
引用回帖:
8楼: Originally posted by 0624410024 at 2011-11-25 10:59:18:
如果你确定你这种酶为限制性内切酶，而你只是想知道它的酶切位点的碱基的话，我觉得你是不是可以酶切之前的测序，然后酶切后的片段测序，然后比较下应该能知道在那里进行酶切的吧？个人观点哈~~

那我想问问你这种酶是咋过弄出来的！你弄到这种酶肯定知道有关它的信息吧？~我个人感觉还有一种方法就是吧大多数酶的酶切位点进行下分析，然后把酶切的序列连在一起，人工合成一段DNA序列，这样你的引物就好设计了！然后再用你的酶去切！只有四种碱基，要合成的DNA也应该不是很长，4的4次方吧？纯属个人观点哈！~~海涵哈~~~
赞一下(1人) 回复此楼
每天坚持多一点，以后困难少一点！
11楼2011-11-25 16:45:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

青豆同学

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励交流! 2011-11-27 11:17:45
多整点底物来切，片段够了就可以测序啦，我瞎说的，不知道可行否
赞一下(1人) 回复此楼
谢谢你给我信心与力量，我会努力！
12楼2011-11-25 20:59:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tdhslxiaoyao

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
wanhscn(金币+3): 鼓励新虫多发贴！鼓励多来分子生物版！ 2011-11-27 16:14:54
额，酶也不是很贵，不行买个得了，干嘛废那事情
赞一下(1人) 回复此楼
13楼2011-11-27 11:41:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenchuan24891

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

理论上7楼说的是可以的，但是正如9楼所说的一样，楼主对你的酶都完全不了解，所以反应体系也确定不了，那你也不好找合适的片段来进行酶切，如果楼主有兴趣的话是可以试一下，反正也不知道是什么酶，说不定有新的发现。
赞一下 回复此楼
14楼2011-11-28 12:08:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rainontime

新虫 (小有名气)
很多文献上都用Maxam-Gilbert方法，请问有人知道这种方法吗？
赞一下 回复此楼
15楼2011-11-28 15:03:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

0624410024

金虫 (正式写手)

Begging for knowledge
★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励交流 2011-11-28 18:01:51
引用回帖:
15楼: Originally posted by rainontime at 2011-11-28 15:03:13:
很多文献上都用Maxam-Gilbert方法，请问有人知道这种方法吗？

你说的这种方法是普片用于DNA 片段序列的测定。其原理为：将一个 DNA 片段的 5' 端磷酸基作放射性标记，再分别采用不同的化学方法修饰和裂解特定碱基，从而产生一系列长度不一而 5' 端被标记的 DNA 片段，这些以特定碱基结尾的片段群通过凝胶电泳分离，再经放射线自显影，确定各片段末端碱基，从而得出目的 DNA 的碱基序列。
赞一下(1人) 回复此楼
每天坚持多一点，以后困难少一点！
16楼2011-11-28 16:44:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
赞一下
17楼2011-11-29 16:35:22
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

大肠菌

新虫 (初入文坛)
您好，我想问您下，您当时是用什么方法确定酶切位点的碱基的？？？？？我现在也想去测定一种限制性内切酶的酶切位点的碱基。wyyngd0422@163.com
赞一下 回复此楼
相识是一种缘分！！珍惜每个相识的人！！
18楼2016-01-22 15:04:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大肠菌

新虫 (初入文坛)
跪求，为止内切酶位点碱基的确定方法
赞一下 回复此楼
相识是一种缘分！！珍惜每个相识的人！！
19楼2016-01-22 16:20:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 rainontime 的主题更新
192/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 12/600 2026-08-12 01:27 by 南京中西医
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[论文投稿] 职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊 +3 工厂打螺丝 2026-08-08 3/150 2026-08-11 13:42 by 会议编辑
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] filecode +9 documentary 2026-08-10 9/450 2026-08-11 10:08 by wk7465
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭