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rainontime

新虫 (小有名气)

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[求助] 如何确定未知内切酶的位点

各位大侠，小女子有一个内切酶，想做实验考察它的酶切位点，不知道有什么好方法，看文献有一个什么Maxam-Gilbert方法，但不是很明白，不知道谁可以帮帮我啊？或者还有什么别的好方法。。。。。谢谢

[ Last edited by 西瓜 on 2011-11-25 at 16:06 ]

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1楼 2011-11-23 15:57:05

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0624410024

金虫 (正式写手)

Begging for knowledge

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【答案】应助回帖

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wanhscn(金币+3): good!鼓励交流! 2011-11-27 11:18:00

引用回帖:

8楼: Originally posted by 0624410024 at 2011-11-25 10:59:18:
如果你确定你这种酶为限制性内切酶，而你只是想知道它的酶切位点的碱基的话，我觉得你是不是可以酶切之前的测序，然后酶切后的片段测序，然后比较下应该能知道在那里进行酶切的吧？个人观点哈~~

那我想问问你这种酶是咋过弄出来的！你弄到这种酶肯定知道有关它的信息吧？~我个人感觉还有一种方法就是吧大多数酶的酶切位点进行下分析，然后把酶切的序列连在一起，人工合成一段DNA序列，这样你的引物就好设计了！然后再用你的酶去切！只有四种碱基，要合成的DNA也应该不是很长，4的4次方吧？纯属个人观点哈！~~海涵哈~~~