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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 如何确定未知内切酶的位点
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rainontime

新虫 (小有名气)

[求助] 如何确定未知内切酶的位点

各位大侠，小女子有一个内切酶，想做实验考察它的酶切位点，不知道有什么好方法，看文献有一个什么Maxam-Gilbert方法，但不是很明白，不知道谁可以帮帮我啊？或者还有什么别的好方法。。。。。谢谢

[ Last edited by 西瓜 on 2011-11-25 at 16:06 ]
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1楼 2011-11-23 15:57:05
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ccharlien

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励交流~ 2011-11-25 16:01:43
引用回帖:
1楼: Originally posted by rainontime at 2011-11-23 15:57:05:
各位大侠，小女子有一个内切酶，想做实验考察它的酶切位点，不知道有什么好方法，看文献有一个什么Maxam-Gilbert方法，但不是很明白，不知道谁可以帮帮我啊？或者还有什么别的好方法。。。。。谢谢

酶是商品化的么？ 很珍贵？ 什么都不知道的话用什么样的体系做酶切
我觉得基本上这个很难 特别是有些酶切位点是甲基化之类的
还是先知道下你心里大概的范围 然后扩几个PCR产物 含有怀疑的酶切位点 像做RFLP那样试试
静待高手
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10楼2011-11-25 15:20:09
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保护你的大树

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

没有听懂你的意思，你的意思是说你现在有个酶但是不知道是什么酶，需要进行酶切验证还是你已经知道这是个什么酶，想晓得它的酶切位点的碱基，你说明白点。
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3楼2011-11-24 00:11:28
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liaojianglin

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

是啊！问题不是很明确
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4楼2011-11-24 10:28:18
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rainontime

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 保护你的大树 at 2011-11-24 00:11:28:
没有听懂你的意思，你的意思是说你现在有个酶但是不知道是什么酶，需要进行酶切验证还是你已经知道这是个什么酶，想晓得它的酶切位点的碱基，你说明白点。

是想知道酶切位点的碱基
赞一下 回复此楼
5楼2011-11-24 10:56:49
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