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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » 转基因植物检测
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zhhuijun

木虫 (正式写手)

[求助] 转基因植物检测

各位虫友，我在检测转基因植物时，第一次PCR我转的基因出来了，很高兴。以为转进去了，我想在PCR一次，可为什么就没了。郁闷？请教各位呀。
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1楼 2011-11-17 08:59:31
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niushuaiji

金虫 (正式写手)

不放弃的小鸟
超同意关于阴性阳性对照的重要性，顺便问下你用的载体上是不是35S启动子，转基因检测开始可以先用35S批一下，然后再用相关目的基因的特性去进一步优化鉴定！
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Tobeornottobe,that'saproblem
12楼2011-11-18 09:08:06
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横眉

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

用的什么酶？ 什么程序？
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2楼2011-11-17 09:29:24
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sxxuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
zhhuijun(金币+1): 我用的是TAq酶 2011-11-17 10:10:47
silicare(金币+3, BioEPI+1): 很详细 2011-11-17 12:12:18
看下引物，酶有没有问题，一般就这两个比较容易降解。
提取的模板有没有降解？
这个检测很容易有假阳性呢。所以正负对照一定要设好。
一般我都算阳性的再重复两次，才确定是阳性。
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你的日子如何，你的力量也必如何！
3楼2011-11-17 09:36:58
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zhhuijun

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 横眉 at 2011-11-17 09:29:24:
用的什么酶？ 什么程序？

我用的就是能前做菌液PCR的程序。谢谢，YAq酶
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4楼2011-11-17 10:16:49
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