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鬼娃娃瑶瑶

新虫 (初入文坛)

[求助] 有两个峰分不开,请教高人

请教高人!
使用的是高效液相

我做的是细胞内提取物的分离和鉴定,主要是想要分开4.063的峰。

4.063的化合物,应该是一个虫草素类似物上有一个磷酸的结构,柱子保留不好。

使用的流动相里面加了0.02M的乙酸铵和0.02%的氨水,基本解决了拖尾现象

现在是用梯度洗脱,因为我本身是学药理的。所以请大家帮忙想办法。
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wangdejuan

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


karl2100(金币+1): 谢谢回复! 2011-11-19 00:34:44
鬼娃娃瑶瑶(金币+1): 我用的是C18柱。谢谢啦~ 2011-11-21 08:15:57
要看你用的柱子是什么类型的,调节流动相的有机相的比例试试,如果是离子交换柱可以调节PH
2楼2011-11-18 10:48:57
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三三cici

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以试试把有机相的比例降低点儿试试,或者把甲醇换成乙腈,多试试吧
亲……加油!
3楼2011-11-18 11:53:03
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光辉

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


karl2100(金币+1): 多谢指教! 2011-11-19 00:34:59
lz给的信息不是很多。正相反相、流动相、梯度、温度、pH、流速都没有。
看出峰时间有点早,很容易和溶剂峰混到一起。
想分开的话试一下其他的有机溶剂、调pH、温度都可以,当然,换根效率高的柱子更好。
简单的方法的话,可以试试降低流速,这个通常比较有效,不过可能要延长一下洗脱时间,防止杂质洗不出来,影响下面的样品。
4楼2011-11-18 15:36:45
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rainbowseer

铁虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


karl2100(金币+1): 3Q 2011-11-19 00:35:47
鬼娃娃瑶瑶(金币+2): 谢谢,我试了试,很管用!谢谢~非常感谢 2011-11-21 08:17:05
我觉得化合物含有磷酸结构,那就应该是酸性的成分,为了保留好点应该让流动相成酸性,那样应该会好点,同时调低有机溶剂的比例,或者前处理用酸碱萃取什么的处理一下
5楼2011-11-18 15:43:34
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