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构建植物表达载体pBI121带着GUS有木有影响啊
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taigongzaici
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构建植物表达载体pBI121带着GUS有木有影响啊
各位大侠
本人有个问题请教,谢谢!
我目前在构建植物表达载体pBI121,有人说切掉GUS,换上我的目的基因;还有人说不需要切掉GUS,只需要将我的目的基因去掉终止子,连在GUS之前就可以了,带着GUS,为后续的染色提供方便。还有人说,带着GUS,容易发生蛋白融合现象,对我后续的实验也许会有影响。还有人说,做一个带GUS的,做一个不带GUS的,当个对照,我晕了,在这里请教各位高手,谁能给俺个比较详细权威的说法,谢谢,不胜感激!!
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liaotiantian
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1楼
2011-11-15 10:59:54
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【答案】应助回帖
关于你说GUS存在会对蛋白表达有影响什么的,这个我也不是特别的清楚的。
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2011-11-15 19:14:19
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liaotiantian
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【答案】应助回帖
★ ★
taigongzaici(金币+1): 友情参与 2011-11-16 16:23:32
西瓜(金币+2): 欢迎交流啊 2011-11-28 17:50:06
哇哇哇,这么巧额,整好我现在也构建载体也用pBI121,GUS我没有动,后面要做GUS染色嘛。我用的XbaIBamHI 连接的外源。外源最好用双酶切位点,单酶切位点还要考虑正反的。酶切位点的选择一定要慎重!
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2楼
2011-11-15 19:11:47
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★
taigongzaici(金币+1): 和没说一样 2011-11-16 16:23:58
西瓜(金币+1): good 2011-11-28 17:50:18
主要看你干什么喽!连GUS的目的是为了定位你目的基因的组织表达与分布情况,如果需要研究这块内容就要连上GUS,如果不需要就切掉吧!
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天才就怕不够天才,坏又不够坏,天天都想离开,却不知何处才能换骨脱胎
4楼
2011-11-15 20:33:27
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期待高人来解答!!!!
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