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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 构建植物表达载体pBI121带着GUS有木有影响啊
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taigongzaici

新虫 (小有名气)

[求助] 构建植物表达载体pBI121带着GUS有木有影响啊

各位大侠
本人有个问题请教，谢谢！

    我目前在构建植物表达载体pBI121，有人说切掉GUS，换上我的目的基因；还有人说不需要切掉GUS，只需要将我的目的基因去掉终止子，连在GUS之前就可以了，带着GUS，为后续的染色提供方便。还有人说，带着GUS，容易发生蛋白融合现象，对我后续的实验也许会有影响。还有人说，做一个带GUS的，做一个不带GUS的，当个对照，我晕了，在这里请教各位高手，谁能给俺个比较详细权威的说法，谢谢，不胜感激！！
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@liaotiantian

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1楼 2011-11-15 10:59:54
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liaotiantian

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
taigongzaici(金币+1): 友情参与 2011-11-16 16:23:32
西瓜(金币+2): 欢迎交流啊 2011-11-28 17:50:06
哇哇哇，这么巧额，整好我现在也构建载体也用pBI121,GUS我没有动，后面要做GUS染色嘛。我用的XbaIBamHI 连接的外源。外源最好用双酶切位点，单酶切位点还要考虑正反的。酶切位点的选择一定要慎重！
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2楼2011-11-15 19:11:47
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liaotiantian

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

关于你说GUS存在会对蛋白表达有影响什么的，这个我也不是特别的清楚的。
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3楼2011-11-15 19:14:19
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youngker918

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
taigongzaici(金币+1): 和没说一样 2011-11-16 16:23:58
西瓜(金币+1): good 2011-11-28 17:50:18
主要看你干什么喽！连GUS的目的是为了定位你目的基因的组织表达与分布情况，如果需要研究这块内容就要连上GUS，如果不需要就切掉吧！
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天才就怕不够天才，坏又不够坏，天天都想离开，却不知何处才能换骨脱胎
4楼2011-11-15 20:33:27
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taigongzaici

新虫 (小有名气)
期待高人来解答！！！！
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5楼2011-11-16 16:25:14
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taigongzaici

新虫 (小有名气)
为啥木有人给我回答！！！
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6楼2011-11-22 13:01:09
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jeffzm

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

taigongzaici(金币+1): 没说到点子上 2011-11-24 12:38:54
看你试验的目的是什么了？如果为了得到转基因植株去掉gus比较好，安全转基因嘛！要是为了进行基因功能检测那得带着gus了，看看它的表达！
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7楼2011-11-24 10:13:57
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jeffzm

铁虫 (初入文坛)
你都没说你接下来要做什么啊。。
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8楼2011-11-25 10:51:05
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taigongzaici

新虫 (小有名气)
我要搞清楚再做决定
带着GUS，容易发生蛋白融合现象，对我后续的实验也许会有影响。还有人说，做一个带GUS的，做一个不带GUS的，当个对照，
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9楼2011-11-28 12:17:44
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宫保鸡丁YZ

银虫 (小有名气)
一同求教，我有个水稻的mRNA,打算就把编码序列（CDs）扩出来，作为目的基因，请问我把这段目的片段放在35S和GUS基因之间的话，能表达出来吗？因为我是导到拟南芥里的，得用双子叶植物的启动子。
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面包会有的，牛奶也会有的
10楼2012-12-02 12:30:12
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