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llower

银虫 (初入文坛)

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[求助] 硅胶柱层析分离未知化合物流动相的确立

我使用硅胶柱分离氯仿萃取部分，目前知道氯仿层有活性物质，但不知道具体是什么，想多分离出来几种物质进行下活性研究。现有以下几个问题不明白，希望大家赐教。
1.流动相应该使用什么合理啊？我看有前面资料说用石油醚：乙酸乙酯或石油醚：丙酮，我想知道哪个好一些啊
2.假设用石油醚：乙酸乙酯做流动相梯度洗脱都应该设置什么比例啊，每个组分的比例又应该冲多少柱体积啊
3.薄层板追踪的话，薄层的展开剂应该使用什么啊，因为是未知化合物，薄层的显色剂又应该选择什么啊

本人刚开始做实验，真心求教，谢谢大家了

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1楼 2011-11-13 19:25:45

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zhangkun8005

木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★
qinhy(金币+1): 多谢参与交流~ 2011-11-14 21:55:05

1.首先，不是说哪个好，洗脱机的选择跟你的目标成分有关系，你可以先用薄层摸一下条件，看哪种流动相成点性好再决定
2.流动相的起始比例可以通过点薄层板，一般前沿斑点Rf值在0.2~0.3即可
3.展开剂一般是你流动相，显色剂一般用硫酸乙醇，通用显色剂

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2楼2011-11-13 21:35:18

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jiao63415719

银虫 (著名写手)

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【答案】应助回帖

★
llower(金币+10): 2011-11-14 16:51:02
qinhy(金币+1): 多谢参与交流~ 2011-11-14 21:55:11

觉得你三个问题像是倒过来了.其实应该是用薄层板来摸条件,决定展开剂,用的流动相,然后就可以回答第2\3个问题了.最适的比例肯定要自己去摸,不过,你可以知道是哪一大类的物质,然后参考别人的条件.

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3楼2011-11-13 23:05:53

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llower

银虫 (初入文坛)

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引用回帖:

2楼: Originally posted by zhangkun8005 at 2011-11-13 21:35:18:
1.首先，不是说哪个好，洗脱机的选择跟你的目标成分有关系，你可以先用薄层摸一下条件，看哪种流动相成点性好再决定
2.流动相的起始比例可以通过点薄层板，一般前沿斑点Rf值在0.2~0.3即可
3.展开剂一般是你流动 ...

谢谢你的帮助，多少有些思路了，但是还有一个问题，展开剂是流动相的那个比例合适啊是要点板看下rf值确定吗

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4楼2011-11-14 16:50:08

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llower

银虫 (初入文坛)

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引用回帖:

3楼: Originally posted by jiao63415719 at 2011-11-13 23:05:53:
觉得你三个问题像是倒过来了.其实应该是用薄层板来摸条件,决定展开剂,用的流动相,然后就可以回答第2\3个问题了.最适的比例肯定要自己去摸,不过,你可以知道是哪一大类的物质,然后参考别人的条件.

哦谢谢你。

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