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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 硫酸沉淀一定是蛋白质吗？
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richart

金虫 (正式写手)

[求助] 硫酸沉淀一定是蛋白质吗？

请问各位高手，硫酸铵沉淀出来的物质一定是蛋白质吗？ 另外硫酸铵分级沉淀的物质有活性，为什么跑蛋白电泳没有带呢？用PEG浓缩也不行，请各位大侠帮忙？？？
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1楼 2011-11-10 20:12:36
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shicaozhu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

richart(金币+4): 2011-11-21 08:44:32
硫酸铵能沉淀出的差不多都是蛋白质，但有可能也有小分子的蛋白包裹了一些你的目的蛋白，小分子蛋白在电泳时跑出去了，而目的蛋白含量太低，所以看不到带。要不试试分级沉淀完了用凝胶柱脱盐然后再浓缩上样跑胶看看？
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2楼2011-11-12 22:10:34
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seahow

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

richart(金币+3): 2011-11-21 08:44:41
你应该先了解沉淀蛋白的原理，前者硫酸铵是通过盐析方法，实际上是抢了蛋白的水，所以沉淀；后者PEG有机沉淀，本质也是抢了水分，而且更剧烈一些。
所以，二者不一定是沉淀蛋白质。沉下来的还有其他东西，这是肯定的尤其是你的粗产品时候，呵呵。
至于分级沉淀有活性而没有条带，那问题就多了， 活性是否真实？ page是否合理，等等。
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3楼2011-11-13 09:38:50
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rfengyi

禁虫 (正式写手)
richart(金币+3): 2011-11-21 08:44:45
本帖内容被屏蔽
4楼2011-11-13 10:39:36
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弦上的梦99

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by seahow at 2011-11-13 09:38:50
你应该先了解沉淀蛋白的原理，前者硫酸铵是通过盐析方法，实际上是抢了蛋白的水，所以沉淀；后者PEG有机沉淀，本质也是抢了水分，而且更剧烈一些。
所以，二者不一定是沉淀蛋白质。沉下来的还有其他东西，这是肯定 ...

那请问硫酸铵本身在离心时沉淀了没？
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5楼2015-01-30 12:33:46
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