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cigoo329

木虫 (小有名气)

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[交流] 融合蛋白在不同细胞系表达已有2人参与

不知道大家对gfp-重组质粒在不同细胞系中表达的差异性有什么见解？

同一个真核表达质粒在一种细胞系中24H 其所编码蛋白表达量达到峰值绿色光亮最亮，表达持续时间短; 而在另一细胞系中48H表达量才达到峰值,表达持续到72h,绿色光亮逐渐消失,。什么因素导致了这样的差异？融合蛋白的寿命似乎在两种细胞中是不一样的。

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1楼 2011-11-09 11:04:38

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cigoo329

木虫 (小有名气)

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引用回帖:

3楼: Originally posted by 凡子1985 at 2011-11-21 02:07:07:
是稳转还是瞬转如果是因为你表达的问题，比如质粒丢失导致蛋白到后来都不表达了那么这个问题就没意思了。如果确定是因为真的蛋白稳定存在在细胞中出现了这个现象那就有意思了你是否把基因本身的启动子序列 ...

两细胞系都是瞬转，重复了实验，一直是这个现象。用的是一个鼠系细胞和一个人系细胞。生长曲线结果表示两种细胞系增殖能力，倍增时间相近。质粒用的是真核表达GFP质粒。