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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 融合蛋白在不同细胞系表达
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cigoo329

木虫 (小有名气)

[交流] 融合蛋白在不同细胞系表达 已有2人参与

不知道大家对gfp-重组质粒在不同细胞系中表达的差异性有什么见解？

同一个真核表达质粒在一种细胞系中24H 其所编码蛋白表达量达到峰值绿色光亮最亮，表达持续时间短; 而在另一细胞系中48H表达量才达到峰值,表达持续到72h,绿色光亮逐渐消失,。什么因素导致了这样的差异？融合蛋白的寿命似乎在两种细胞中是不一样的。
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1楼 2011-11-09 11:04:38
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nach

铜虫 (著名写手)

不让吃就去死
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
确定不是光漂白？
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不让吃就去死
2楼2011-11-21 00:33:54
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凡子1985

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
是稳转还是瞬转 如果 是因为你表达的问题，比如质粒丢失 导致蛋白到后来都不表达了 那么这个问题就没意思了。如果确定是因为真的蛋白稳定存在在细胞中  出现了这个现象 那就有意思了 你是否把基因本身的启动子序列也克隆到载体上去了？ 应该没有  如果没有 那这个问题 不要多想了 纯属偶然 系统问题 如果有 那么这个就有意思了
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3楼2011-11-21 02:07:07
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cigoo329

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by nach at 2011-11-21 00:33:54:
确定不是光漂白？

观察条件一致，可以确定不是光漂白。谢谢
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微流控产业化 +QQ群：189423993
4楼2011-11-21 14:23:20
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cigoo329

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 凡子1985 at 2011-11-21 02:07:07:
是稳转还是瞬转 如果 是因为你表达的问题，比如质粒丢失 导致蛋白到后来都不表达了 那么这个问题就没意思了。如果确定是因为真的蛋白稳定存在在细胞中  出现了这个现象 那就有意思了 你是否把基因本身的启动子序列 ...

两细胞系都是瞬转，重复了实验，一直是这个现象。用的是一个鼠系细胞和一个人系细胞。生长曲线结果表示两种细胞系增殖能力，倍增时间相近。质粒用的是真核表达GFP质粒。
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微流控产业化 +QQ群：189423993
5楼2011-11-21 14:29:46
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