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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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HarveyWang

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海外行者
引用回帖:
10楼: Originally posted by H-xiangzhu at 2011-11-10 14:56:44:
你好！我有个疑问哈，比较白痴的，就是我的样品放通风橱里面会不会有污染的可能呢、？

你到底测什么？
测定酸类物质，就两个小时，应该没事哈。

不过这要看你的实验室到底有多脏？要是飞进去一个苍蝇也是有可能的
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
11楼2011-11-10 15:15:47
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H-xiangzhu

金虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by HarveyWang at 2011-11-10 15:15:47:
你到底测什么？
测定酸类物质，就两个小时，应该没事哈。

不过这要看你的实验室到底有多脏？要是飞进去一个苍蝇也是有可能的

我的是放线菌发酵液，我要测杀虫活性物质，然后确定是胞内还是胞外的，是大分子还是小分子物质。
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12楼2011-11-11 09:46:28
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HarveyWang

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海外行者
★
zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2011-11-14 09:21:22
引用回帖:
12楼: Originally posted by H-xiangzhu at 2011-11-11 09:46:28:
我的是放线菌发酵液，我要测杀虫活性物质，然后确定是胞内还是胞外的，是大分子还是小分子物质。

原来这样啊。先看有没有，根本不用向代谢组学一样麻烦。
步骤如下：

1.测定胞外的活性物质：

用灭菌的EP管，无菌取样，然后10000rpm 离心5min，什么放线菌或细菌都会沉下去，然后用无菌的1% NaCl稀释发酵离心上清液一系列浓度。然后做抑菌圈实验。


2.胞内的活性物质：
由于不能确定是溶于有机溶剂的还是水溶性的。故拿细胞破碎液来做。
取菌丝沉淀，用无菌的1% NaCl清洗两遍，以洗掉发酵液。
离心沉淀菌丝体，然后用1% NaCl超声破碎，此时菌丝体越浓越好。

破碎液分为两份：
A份用1% NaCl稀释一下，然后10000rpm 离心20min，上清液用无菌的NaCl稀释一系列梯度，做抑菌圈实验。

B份用有机溶剂，例如无水乙醇或丙酮等萃取，然后蒸干或风干（步骤见前面我说的）。最好用丙酮来做，丙酮容易蒸掉。最后的干燥物用灭菌的1% NaCl稀释一下，做抑菌圈实验。


3.抑菌圈实验：
在平板上涂目的细菌，例如八叠球菌或葡萄球菌等。
用那种灭菌的不锈钢筒（内径大约为4mm，高度大约为1cm，没有底）扣在此平板上。
每个平板可以扣4-8个。
然后向圈内加20uL或50uL的上面的抑菌物质稀释液。
用卡那霉素或青霉素做阳性对照。
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H-xiangzhu
【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
13楼2011-11-11 19:00:37
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H-xiangzhu

金虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
13楼: Originally posted by HarveyWang at 2011-11-11 19:00:37:
原来这样啊。先看有没有，根本不用向代谢组学一样麻烦。
步骤如下：

1.测定胞外的活性物质：

用灭菌的EP管，无菌取样，然后10000rpm 离心5min，什么放线菌或细菌都会沉下去，然后用无菌的1% NaCl稀释发酵 ...

好的~~你的回复对我帮助很大，非常感谢你的帮忙~
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14楼2011-11-13 16:38:44
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H-xiangzhu

金虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by HarveyWang at 2011-11-11 19:00:37:
原来这样啊。先看有没有，根本不用向代谢组学一样麻烦。
步骤如下：

1.测定胞外的活性物质：

用灭菌的EP管，无菌取样，然后10000rpm 离心5min，什么放线菌或细菌都会沉下去，然后用无菌的1% NaCl稀释发酵 ...

你好！由于我样品比较多，每次都要超声破碎的话很费时费力，请问我能否用甲醇浸泡呢？浸泡完是不是要去甲醇然后用丙酮等有机溶剂进行处理？
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15楼2011-12-16 13:40:09
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HarveyWang

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海外行者
引用回帖:
15楼: Originally posted by H-xiangzhu at 2011-12-16 13:40:09:
你好！由于我样品比较多，每次都要超声破碎的话很费时费力，请问我能否用甲醇浸泡呢？浸泡完是不是要去甲醇然后用丙酮等有机溶剂进行处理？

直接用丙酮浸泡说不定也行。
振荡浸泡一晚，看看菌体碎了就行。
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16楼2011-12-16 15:12:02
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H-xiangzhu

金虫 (正式写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by HarveyWang at 2011-12-16 15:12:02:
直接用丙酮浸泡说不定也行。
振荡浸泡一晚，看看菌体碎了就行。

嗯那后面有机溶剂浓缩挥发直接用于生测就可以的吧？
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17楼2011-12-16 23:46:19
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HarveyWang

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海外行者
★ ★ ★
scelab(金币+3): 谢谢热心回复哦~ 2011-12-17 02:31:57
引用回帖:
17楼: Originally posted by H-xiangzhu at 2011-12-16 23:46:19:
嗯那后面有机溶剂浓缩挥发直接用于生测就可以的吧？

如果丙酮的话，可以挥发很快。
直接生测，要稀释很多倍吧？用无菌水。
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18楼2011-12-17 02:22:46
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xiaopan0102

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3580989楼: Originally posted by HarveyWang at 2011-11-07 14:10:46:
1.我一般就是放在通风橱几个小时，丙酮很快就挥发完了。剩余的主要是水分溶液。
乙醇的较难挥发，几个小时后放在40摄氏度的抽真空的恒温箱中，大约一个小时可以抽完剩余水分。

2.注意事项！
这时候要注意，你到

您好，我想咨询一个问题，我想将发酵液中的大分子和小分子物质分开，做活性试验，然后确定有效部分，再继续鉴定，不知道您有没有好的建议，我应该用什么方法将大小分子分开？然后怎样对有效组分的成分定性？先谢谢了！
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19楼2012-05-21 20:22:45
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xz010

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4576786楼: Originally posted by xiaopan0102 at 2012-05-21 20:22:45
您好，我想咨询一个问题，我想将发酵液中的大分子和小分子物质分开，做活性试验，然后确定有效部分，再继续鉴定，不知道您有没有好的建议，我应该用什么方法将大小分子分开？然后怎样对有效组分的成分定性？先谢谢 ...

估计要跑柱子了 不知道我说对不对
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20楼2012-06-28 19:41:21
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