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wx1119

铜虫 (小有名气)

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[求助] DGGE扩增问题

各位大侠，本人扩增DGGE V3区用的是B357-GC和B517，已经做了2个多月，但是一直扩增不出来片段，用不带GC夹的就能狗扩增出来！
PCR条件：95  10min
               93 30s
               52 45s
               72 1min
               30个循环
      72 5min
总基因组DNA是沼气发酵过程中的样品DNA

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1楼 2011-11-04 16:37:05

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wx1119

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引用回帖:

7楼: Originally posted by yyz1001 at 2011-11-09 01:46:07:
LZ别着急，DGGE是需要不停地摸条件的~加油加油！
BSA我做细菌是不加的，真菌的时候加0.25。
不过我同意楼上童鞋的意见，你的预变性太长啦，5min足够啦~
话说你带GC夹PCR以后琼脂糖电泳有条带么？

我今天又做了一次，没有引物二聚体，是不是引物的量不够呀！
我的引物浓度是10nM