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hippozhaoyue

铁虫 (正式写手)

[求助] 求大神解答小菜鸟心中的疑惑,HPLC强的过来救命啊

最近刚学HPLC,waters的,用的C18柱子,想做一个十二烷基本磺酸钠的标样,UV检测器,查了一下文献,检测波长调到221nm,流速0.2毫升每min,A相用的50%超纯水,C相用的50%甲醇
问题是:
出了两个峰,一个在1.6min左右,比较小,另一个1.8min左右,是一个很大的负峰,为什么会有负峰啊,那特征吸收时间按哪个算啊???
纠结。。。。。
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jxlong

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你的情情况应该标品还没有出峰,你使用什么型号的柱子?
4楼2011-11-03 11:48:26
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yukepotato

金虫 (正式写手)

美猴王

【答案】应助回帖

上个图看看呢。
流动相有没有问题,都是色谱纯的?
永远不要带着问题去找你的上司!
2楼2011-11-03 10:40:26
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njkinghu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

hippozhaoyue(金币+2): 大神你是我偶像,试了一下,果然可以啊,太崇拜你了 2011-11-03 16:49:19
“A相用的50%超纯水,C相用的50%甲醇“这句话我没弄懂是什么意思,麻烦楼主解释一下,负锋很常见的,如果你进的东西吸收比流动相还小的话就会出负锋的,你可以把空白流动相和加了样品的流动相扫各紫外光谱,看下最大吸收在哪,你因该是选的波长不对,样品吸收比流动相小了
3楼2011-11-03 10:43:30
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zhengxim

木虫 (正式写手)

引用回帖:
1楼: Originally posted by hippozhaoyue at 2011-11-03 10:29:12:
最近刚学HPLC,waters的,用的C18柱子,想做一个十二烷基本磺酸钠的标样,UV检测器,查了一下文献,检测波长调到221nm,流速0.2毫升每min,A相用的50%超纯水,C相用的50%甲醇
问题是:
出了两个峰,一个在1.6mi ...

你不要设置参比波长试试看
啊啊啊
5楼2011-11-03 20:57:45
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