PCR产物回收之后跑胶浓度过低 - 分子生物 - 综合其他 - 第2页小木虫论坛-学术科研互动平台

伟大航线....

11楼2011-11-03 11:35:11

youngker918

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你要回收的目标条带的bp数好像很小呀！400bp以下的条带在回收时除了加A溶胶液和B溶胶液外还要再加1/3体积的A溶胶液，然后再加到柱子上

天才就怕不够天才，坏又不够坏，天天都想离开，却不知何处才能换骨脱胎

12楼2011-11-03 13:49:48

shuifen1108

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引用回帖:

12楼: Originally posted by youngker918 at 2011-11-03 13:49:48:
你要回收的目标条带的bp数好像很小呀！400bp以下的条带在回收时除了加A溶胶液和B溶胶液外还要再加1/3体积的A溶胶液，然后再加到柱子上

有三个片段是小于400bp的，按照试剂盒上的指示，加完I和II溶液之后，加总体积为20%的异丙醇，大于400的不用加

13楼2011-11-03 15:09:21

wcwluwei

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14楼2011-11-05 14:34:08

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西瓜(金币+1): 鼓励反馈 2011-11-05 21:59:54

引用回帖:

14楼: Originally posted by wcwluwei at 2011-11-05 14:34:08:
也不是跑得特别差，只是光线太不好了看不清楚什么现在知道问题在哪里了嘛？

嘿嘿被我逼的说出违心的话了吧下步PCR已经做出来了应该是试剂盒里的柱子被我搞错了要不然就是溶胶出问题了

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15楼2011-11-05 19:03:52

mayonghong

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西瓜(金币+1): 这个第一次听说，学习了！ 2011-11-05 22:01:00
wanhscn(金币+1): 这个有新意！ 2011-11-06 08:20:11

融完胶上柱子后可以再-20度放置5-10min，低温有利于DNA吸附，这样会增加回收产率！

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一生有你

16楼2011-11-05 20:27:06

shuifen1108

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16楼: Originally posted by mayonghong at 2011-11-05 20:27:06:
融完胶上柱子后可以再-20度放置5-10min，低温有利于DNA吸附，这样会增加回收产率！

第一次听说嘿嘿下次试试

17楼2011-11-06 09:14:35

wcx蜗牛

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16楼: Originally posted by mayonghong at 2011-11-05 20:27:06:
融完胶上柱子后可以再-20度放置5-10min，低温有利于DNA吸附，这样会增加回收产率！

我做切胶回收回收率也不是很高，你说上吸附柱后放-20，温度这么低能否利于DNA的吸附。

18楼2012-03-03 11:10:22