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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR产物回收之后跑胶浓度过低
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longrna

新虫 (正式写手)
★
西瓜(金币+1): 溶胶时间过长可能对DNA有损伤，但一般问题不大哈 2011-11-05 21:59:26
引用回帖:
10楼: Originally posted by shuifen1108 at 2011-11-03 11:25:28:
I am sorry,本来想给三个金币的  结果只剩下一个了，非常对不起啊。

金币事小，希望能对你有所帮助。^-^
溶胶时间虽是那么说，估计也不是主要因素（也没你想象中那么大影响）。
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伟大航线....
11楼2011-11-03 11:35:11
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youngker918

金虫 (正式写手)
你要回收的目标条带的bp数好像很小呀！400bp以下的条带在回收时除了加A溶胶液和B溶胶液外还要再加1/3体积的A溶胶液，然后再加到柱子上
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天才就怕不够天才，坏又不够坏，天天都想离开，却不知何处才能换骨脱胎
12楼2011-11-03 13:49:48
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shuifen1108

金虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by youngker918 at 2011-11-03 13:49:48:
你要回收的目标条带的bp数好像很小呀！400bp以下的条带在回收时除了加A溶胶液和B溶胶液外还要再加1/3体积的A溶胶液，然后再加到柱子上

有三个片段是小于400bp的，按照试剂盒上的指示，加完I和II溶液之后，加总体积为20%的异丙醇，大于400的不用加
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13楼2011-11-03 15:09:21
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wcwluwei

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
14楼2011-11-05 14:34:08
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shuifen1108

金虫 (正式写手)
★
西瓜(金币+1): 鼓励反馈 2011-11-05 21:59:54
引用回帖:
14楼: Originally posted by wcwluwei at 2011-11-05 14:34:08:
也不是跑得特别差，只是光线太不好了  看不清楚什么   现在知道问题在哪里了嘛？

嘿嘿  被我逼的说出违心的话了吧  下步PCR已经做出来了  应该是试剂盒里的柱子被我搞错了  要不然就是溶胶出问题了
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15楼2011-11-05 19:03:52
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mayonghong

铜虫 (初入文坛)
★ ★
西瓜(金币+1): 这个第一次听说，学习了！ 2011-11-05 22:01:00
wanhscn(金币+1): 这个有新意！ 2011-11-06 08:20:11
融完胶上柱子后可以再-20度放置5-10min，低温有利于DNA吸附，这样会增加回收产率！
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一生有你
16楼2011-11-05 20:27:06
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shuifen1108

金虫 (正式写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by mayonghong at 2011-11-05 20:27:06:
融完胶上柱子后可以再-20度放置5-10min，低温有利于DNA吸附，这样会增加回收产率！

第一次听说   嘿嘿  下次试试
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17楼2011-11-06 09:14:35
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wcx蜗牛

无虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by mayonghong at 2011-11-05 20:27:06:
融完胶上柱子后可以再-20度放置5-10min，低温有利于DNA吸附，这样会增加回收产率！

我做切胶回收回收率也不是很高，你说上吸附柱后放-20，温度这么低能否利于DNA的吸附。
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18楼2012-03-03 11:10:22
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