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sayfxxk2u

新虫 (小有名气)

[求助] 酶切问题

pET-28a质粒,带有Xba1和Sca1酶切位点,
100微升体系,用Sca1 2ou酶切3h后,乙醇沉淀后,再用Xba1 2ou切3h,只看见切出来的线性带(就是有的目的带)但是没有看到大片载体带,成糊状的。
用的酶是fermentas的酶。请问各位大侠有没有遇到这样的情况。
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空谷幽风

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


西瓜(金币+1): Good 2011-11-05 22:02:48
用两种酶分别单酶切载体,跑胶看能否都是得到单一的条带
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
4楼2011-11-03 18:55:05
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zhunning

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

既然得到目的条带了,割胶回收不就得了
2楼2011-11-02 15:04:14
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sayfxxk2u

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhunning at 2011-11-02 15:04:14:
既然得到目的条带了,割胶回收不就得了

那我表述有问题,目的条带是双酶切剩下的,我要的是载体。。。。
3楼2011-11-03 17:00:16
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sayfxxk2u

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 空谷幽风 at 2011-11-03 18:55:05:
用两种酶分别单酶切载体,跑胶看能否都是得到单一的条带

会产生很严重的拖尾。
5楼2011-11-04 23:39:47
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