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sayfxxk2u

新虫 (小有名气)

[求助] 酶切问题

pET-28a质粒,带有Xba1和Sca1酶切位点,
100微升体系,用Sca1 2ou酶切3h后,乙醇沉淀后,再用Xba1 2ou切3h,只看见切出来的线性带(就是有的目的带)但是没有看到大片载体带,成糊状的。
用的酶是fermentas的酶。请问各位大侠有没有遇到这样的情况。
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空谷幽风

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


西瓜(金币+1): Good 2011-11-05 22:02:48
用两种酶分别单酶切载体,跑胶看能否都是得到单一的条带
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
4楼2011-11-03 18:55:05
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空谷幽风

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


西瓜(金币+1): 也可以看看酶过期了没有。 2011-11-05 22:03:15
引用回帖:
5楼: Originally posted by sayfxxk2u at 2011-11-04 23:39:47:
会产生很严重的拖尾。

如果可以换个其他公司的酶切切试试,如果还是这样就是质粒的问题
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
6楼2011-11-05 11:55:15
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