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目的片段与表达载体的连接
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1kb的目的片段与PET-19b连接,转化DH5a,平板培养16小时无菌落。做了空载体转化的对照,14小时平板菌落长得很好,也就是问题出在连接,怎么优化连接呢,有什么需要注意的? PS: 连接体系 14μl 目的片段,3μl 酶切载体,2μl buffer,1μl T4连接酶。(带有目的片段的T载体和PET载体都是用试剂盒提,使用相同的酶切体系) |
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空谷幽风
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15楼2011-11-03 19:14:15
imyting
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2楼2011-11-02 10:54:15
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4楼2011-11-02 11:49:24










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