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amq7392

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 菌饼接种技术

有谁做过用打孔器在平板上打出菌饼,然后接种摇瓶的实验啊?请教详细的过程。我做了几次,老是染菌。怎么能保证操作过程的无菌呢?讲得越细越好。
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xiaojiancai

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

amq7392(金币+2): 谢谢 2011-11-01 10:19:02
首先要保证平板培养过程中未受污染或者有无受污染的可能;
如果平板很纯,接下来才能进行下一步操作:在无菌操作间严格按照无菌操作要求打孔及接种,这个应该没问题吧?
最后在摇床培养时也得注意转速的控制,还有瓶塞的空气过滤是否能保证无菌,可以用比较大较松散的棉塞或者用4-8层纱布包裹。
知福福常在,随缘缘自来!
8楼2011-11-01 09:49:10
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newtime007

木虫 (正式写手)

成长的微生物

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流! 2011-10-31 18:29:30
1.你为什么接种菌饼,用打孔器是为了保证接种均匀吗?可平板上的菌密度谁能保证均匀哪?所以用打孔器在平板上打出菌饼没多大意义。
2.如果你想保证试验的平行性,做一级种子培养液吧,每瓶发酵液中接种相同的量,这样更能保证试验的平行。
上善若水,水善利万物而不争
2楼2011-10-31 15:34:44
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张建荣

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


amisking(金币+1): 鼓励发帖交流! 2011-10-31 18:29:35
菌饼接种的目的是什么?对于菌饼接种来说没什么意义吧,如果真要这样的话,你对打孔器灭菌了吗?你在无菌试验台操作了吗?
执着
3楼2011-10-31 15:41:49
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amq7392

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by newtime007 at 2011-10-31 15:34:44:
1.你为什么接种菌饼,用打孔器是为了保证接种均匀吗?可平板上的菌密度谁能保证均匀哪?所以用打孔器在平板上打出菌饼没多大意义。
2.如果你想保证试验的平行性,做一级种子培养液吧,每瓶发酵液中接种相同的量, ...

谢谢您的回复。
我用菌饼接种当然是有理由的:我做的是真菌,不产孢子,摇瓶培养产菌丝球,没有无菌匀浆的条件,怎么制作一级培养种子液?所以只能用打孔器打菌饼,大概保持接种量一致,不用很精确。我的问题是,我用菌饼接种摇瓶时老是染菌,请教操作的细节,比如平板和三角瓶怎么个拿法。您回避我的问题了,呵呵
4楼2011-10-31 18:30:57
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