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1034964469

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求多糖的提取与纯化

我最近在做海参多糖含量的检测,其中多糖提纯的办法已经找到但是就需要加的试剂含量不知道,导师要剂量好去买试剂,故发帖请大虾帮忙。
详细的:取一定海参匀浆,加入木瓜蛋白酶完全水解(木瓜蛋白酶的剂量?相对应的酶活及剂量与样品质量的比例)离心200r/min(是不是这个转速啊?)后浓缩,用Sevage法(多糖提取液与Sevage剂量的比例?)混合、振荡30min,离心200r/min,得到的上清液用双氧水脱色(浓度及剂量)用乙醇(浓度及剂量)沉淀多糖,经凝胶柱纯化(详细点)后冷藏备用
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星辰89

铜虫 (初入文坛)

我除蛋白的时候sevage试剂是氯仿:正丁醇=4:1,是第一次与多糖等量的加,后面除的时候大概就是你的多糖溶液的1/5,第一次等量加的时候不要离心,静置一夜比较好,第二天分层的很明显。
放弃了的就绝不再捡!
7楼2011-12-08 22:59:50
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zlight

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

1034964469(金币+5): 2011-11-03 09:18:15
可以搜搜中国海洋大学、上海海洋大学、浙江工商大学这些学校的文献资料,在多糖这一块他们做的还是比较多的!
上帝爱世人,甚至将他的独生子赐给他们,叫一切信他的,不至灭亡,反得永生.
2楼2011-11-02 10:06:29
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sarsy

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


树树8013(金币+1): 鼓励实践操作交流。欢迎常来食品板块。 2011-11-07 09:05:13
1034964469(金币+5): 2011-11-12 13:15:27
我最近也在做多糖的提取,每个原料的不一样具体步骤也不一样的,你得多尝试下。我做的没有加蛋白酶,直接破碎细胞后90度水提,4000r/min离心后浓缩,醇沉得到初提取的多糖,溶解后在用Sevage法除蛋白质
具体用量什么的还得多尝试下,别人的不一定你能够用的
3楼2011-11-06 14:22:48
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杨-娟

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以参照   李燕妮,车业娜,刘国静著得  分光光度法测定海参多糖含量方法的改进
4楼2011-11-07 12:39:04
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