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天际雾影

新虫 (小有名气)

应助: 7 (幼儿园)
金币: 32.2
帖子: 129
在线: 24.5小时
虫号: 856359

[交流] 酵母双杂交用X-gal显色要注意哪些事啊！

有虫友们做个酵母双杂交实验么？用X-gal显色有哪些特别注意啊？我做的结果不稳定，猜测有些细节没有注意到。求助大家，多多交流。

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1楼 2011-10-29 14:53:43

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FangQu

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 21.9
帖子: 8
在线: 3.3小时
虫号: 9422646

★
天际雾影(金币+2): 谢谢参与

引用回帖:

4楼: Originally posted by l8843802 at 2011-12-11 00:22:40
x-gal staining ，x-gal要现配现用并且注意遮光保存。当然z-buffer可以放置久一点。另外就是液氮冰冻菌的时候可以试试反复冻融，这样会使细胞破碎的更加完全一些，便于染色液的渗透。还有就是，y2h验证的蛋白只能是 ...

您好，可以请教一下具体步骤吗？

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10楼2019-06-19 20:32:47

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xinnier

银虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 668.5
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在线: 48.3小时
虫号: 825691

★
天际雾影(金币+2):谢谢参与

现在还处在看文献，了解阶段；后面才开始做。大家可以交流讨论( ⊙ o ⊙ )啊！小木上关于这方面的···很少唉！

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2楼2011-11-01 21:18:40

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天际雾影

新虫 (小有名气)

应助: 7 (幼儿园)
金币: 32.2
帖子: 129
在线: 24.5小时
虫号: 856359

引用回帖:

2楼: Originally posted by xinnier at 2011-11-01 21:18:40:
现在还处在看文献，了解阶段；后面才开始做。大家可以交流讨论( ⊙ o ⊙ )啊！小木上关于这方面的···很少唉！

做酵母的确实好少啊！

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3楼2011-11-02 11:40:57

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l8843802

木虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 2867.8
帖子: 24
在线: 40.5小时
虫号: 1202828

★
天际雾影(金币+2):谢谢参与

x-gal staining ，x-gal要现配现用并且注意遮光保存。当然z-buffer可以放置久一点。另外就是液氮冰冻菌的时候可以试试反复冻融，这样会使细胞破碎的更加完全一些，便于染色液的渗透。还有就是，y2h验证的蛋白只能是1对1的。任何通过第三方介导的interaction都无法检测到。染色变蓝得时间应该在12h以内，时间长了就有可能是长菌污染。

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4楼2011-12-11 00:22:40

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