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天际雾影

新虫 (小有名气)


[交流] 酵母双杂交用X-gal显色要注意哪些事啊!

有虫友们做个酵母双杂交实验么?用X-gal显色有哪些特别注意啊?我做的结果不稳定,猜测有些细节没有注意到。求助大家,多多交流。
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l8843802

木虫 (初入文坛)



天际雾影(金币+2):谢谢参与
x-gal staining ,x-gal要现配现用并且注意遮光保存。当然z-buffer可以放置久一点。另外就是液氮冰冻菌的时候可以试试反复冻融,这样会使细胞破碎的更加完全一些,便于染色液的渗透。还有就是,y2h验证的蛋白只能是1对1的。任何通过第三方介导的interaction都无法检测到。染色变蓝得时间应该在12h以内,时间长了就有可能是长菌污染。
4楼2011-12-11 00:22:40
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xinnier

银虫 (小有名气)



天际雾影(金币+2):谢谢参与
现在还处在看文献,了解阶段;后面才开始做。大家可以交流讨论( ⊙ o ⊙ )啊!小木上关于这方面的···很少唉!
2楼2011-11-01 21:18:40
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天际雾影

新虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by xinnier at 2011-11-01 21:18:40:
现在还处在看文献,了解阶段;后面才开始做。大家可以交流讨论( ⊙ o ⊙ )啊!小木上关于这方面的···很少唉!

做酵母的确实好少啊!
3楼2011-11-02 11:40:57
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SHgenomics

新虫 (初入文坛)



天际雾影(金币+2):谢谢参与
silicare: 编辑内容 2012-07-31 16:16
*****************

[ Last edited by silicare on 2012-7-31 at 16:16 ]
5楼2011-12-12 10:59:24
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