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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 农林 » 农林综合 » 叶片中的激素提取不出来
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szslg

银虫 (初入文坛)

[求助] 叶片中的激素提取不出来

Sample Text
我现在用下面的方法来提取草的叶片中的IAA，然后再用高效液相色谱测量，可是提取不出来，不知道有没有人用过这种方法，希望能指点我一下，不胜感激；或者有更好的方法。谢谢  
（1）取0.5g叶片，加液氮研磨至粉碎，然后加入8ml（0.05M，PH=7.0，含0.02%二乙基二硫带氨基甲酸钠）磷酸钠缓冲液，继续研磨至匀浆，倒入离心管中，

（2） 在4。C条件下持续振荡1~2h。

（3） 取出离心管，用1M盐酸调PH约2.6

（4） 加入0.5g XAD-7离子交换树脂，在4。C条件下振荡半小时。
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1楼 2011-10-20 13:08:43
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szslg

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by kukoob at 2011-10-20 13:59:22:
磷酸缓冲液能把叶片中的激素提取出来吗？
我也怀疑这个！
你换换其他的液体试试！
反正也花不了多少钱！
最好同时多做几组不同的方案！

Leaf tissue (20 mg) was ground with a mortar and a pestle
in liquid N, and homogenized in 1.5 mL Na-phosphate buffer
(0.05 M, pH 7.0) containing 0.02% (w/v) sodium diethyldithiocarbamate
as an antioxidant. An internal standard of
13C6–IAA (200 ng) was added into each sample and extracted
by continuous shaking for 1 h at 4°C. The samples were
transferred into 1.5-mL microcentrifuge tubes after extraction
and pH was adjusted to approximately 2.6 with 1.0 M
HCl (about 43 μL of HCl was required for 1 mL of extract).
The sample was slurried with 60 mg of Amberlite XAD-7
(Sigma, MO) for 30 min. After removal of the buff er, the
XAD-7 was washed with 2 × 500 μL of 1% acetic acid before
being slurried with 2 × 500 μL of dichloromethane for 2 ×
30 min (Edlund et al., 1995). The combined dichloromethane
fractions were reduced to dryness with nitrogen gas. Samples
were methylated with ethereal diazomethane at room temperature
according to Prinsen et al. (2000).
这是我们老师给我们的方法，他说可以，但是我就是测不出来~~郁闷啊，你说可能是咱们国产药品配制的缓冲液不准确的原因吗？
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5楼2011-10-20 14:12:39
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kukoob

铁杆木虫 (知名作家)

人类导师

【答案】应助回帖

叶子太少了！
看你选定什么叶子了！
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不知不觉
2楼2011-10-20 13:45:13
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szslg

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by kukoob at 2011-10-20 13:45:13:
叶子太少了！
看你选定什么叶子了！

我前两天也试了试加1g的叶片还是不行。。。不知道是不是提取液的事？磷酸缓冲液能把叶片中的激素提取出来吗？
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3楼2011-10-20 13:54:56
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kukoob

铁杆木虫 (知名作家)

人类导师

【答案】应助回帖

★
缺友情(金币+1): 鼓励应助交流！欢迎常来农林版！ 2011-10-22 17:54:30
szslg(金币+5): 2011-11-10 16:59:28
缺友情: 回帖置顶 2011-12-22 10:47:43
磷酸缓冲液能把叶片中的激素提取出来吗？
我也怀疑这个！
你换换其他的液体试试！
反正也花不了多少钱！
最好同时多做几组不同的方案！
赞一下(1人) 回复此楼
不知不觉
4楼2011-10-20 13:59:22
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查看全部 15 个回答
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