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szslg

银虫 (初入文坛)

[求助] 叶片中的激素提取不出来

Sample Text
我现在用下面的方法来提取草的叶片中的IAA,然后再用高效液相色谱测量,可是提取不出来,不知道有没有人用过这种方法,希望能指点我一下,不胜感激;或者有更好的方法。谢谢  
(1)取0.5g叶片,加液氮研磨至粉碎,然后加入8ml(0.05M,PH=7.0,含0.02%二乙基二硫带氨基甲酸钠)磷酸钠缓冲液,继续研磨至匀浆,倒入离心管中,

(2) 在4。C条件下持续振荡1~2h。

(3) 取出离心管,用1M盐酸调PH约2.6

(4) 加入0.5g XAD-7离子交换树脂,在4。C条件下振荡半小时。
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王海鹏的

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
缺友情(金币+2): 鼓励应助交流!欢迎常来农林版! 2011-10-22 17:54:14
szslg(金币+5): 2011-11-10 16:59:38
缺友情(农林EPI+1): 优秀应助,授予EPI,欢迎常来农林版! 2011-11-12 10:39:46
孙启亮: 回帖置顶 2011-12-22 10:01:32
方法:80%甲醇低温研磨匀浆,1 OOOr/min离心30min ,取上清液,通过C18柱以去除植物色素。初纯化液用N2吹干、去除甲醇,加磷酸氢二钾HB. 0)溶解后,用乙酸乙酷萃取,水相(pH调至2. 5 )再用乙醇乙酷萃取(DHZRs与iPAs用正丁醇提取;ABA还需进行甲醋化)。N2吹干后加磷酸缓冲液溶解,用ELISA测定激素含量。
参见:周燮,植物激素IAA、GAs、CTKs与ABA的免疫检测技术,南京农业大学植物生理教研室编,1992
抱元守一可得永年
6楼2011-10-22 12:26:12
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