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doublehelix

木虫 (著名写手)

大家分析的挺有道理的,胶居然还能跑成这样,长见识了
11楼2011-10-18 11:01:26
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skyseaapple

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

hrjxx(金币+3): 谢谢啊,你是说蛋白没有提出来吗 2011-10-19 18:21:28
这个胶...长见识了...应该不是电泳的问题,是你提取蛋白的问题,你可以用超声破碎再试试
12楼2011-10-18 13:37:05
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violetice

银虫 (小有名气)

提的是什么样品的全蛋白阿?
13楼2011-10-18 14:00:38
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hrjxx

新虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by violetice at 2011-10-18 14:00:38:
提的是什么样品的全蛋白阿?

你好啊 ,是牛肉总蛋白啊
14楼2011-10-19 18:20:27
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我要长大

银虫 (初入文坛)

★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励交流 2011-10-23 22:59:11
我也出现过你这样的问题,我觉得一方面是蛋白开始有降解,还有就是胶的配置过程,丙烯酰胺最多放一个月就不能再用了,这是我的一些经验。
15楼2011-10-19 18:41:07
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hrjxx

新虫 (小有名气)

引用回帖:
15楼: Originally posted by 我要长大 at 2011-10-19 18:41:07:
我也出现过你这样的问题,我觉得一方面是蛋白开始有降解,还有就是胶的配置过程,丙烯酰胺最多放一个月就不能再用了,这是我的一些经验。

后来你是怎么解决的啊??是换丙烯酰胺了,还是重新提的蛋白啊 ??请指教下啊
16楼2011-10-19 19:04:43
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hrjxx

新虫 (小有名气)


西瓜(金币+1): 鼓励上图!祝实验顺利啊! 2011-10-23 22:59:42
谢谢楼上的啊,我蛋白重新提了次,是这样的条带,比以前进步了点,但是没有高分子量的,这是怎么回事啊 。是降解吗》》还是高分子量的比较难溶解啊,还是肉样本身的问题啊 ??中间是Marker,两边是样品,上样样品10,Marker5

中间是Marker,两边是样品,上样样品10,Marker5

17楼2011-10-23 22:09:20
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wxq999

新虫 (小有名气)

西瓜:编辑内容 2011-10-24 17:51
-------------广告内容-----------------
该虫多次发布广告,为了避免版主刷管理记录的嫌疑,不再每个帖子单独扣分,而是分几次重罚。请自重,勿扰乱论坛的正常交流!

[ Last edited by 西瓜 on 2011-10-24 at 17:51 ]
18楼2011-10-24 17:03:42
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hrjxx

新虫 (小有名气)

随时更新的哦实验进展啊,我昨天又提了次啊,浓度是3.8mg/ml,上样10ul,NI 你看看效果,给分析下啊,没有加硫脲,这次浓度提高是因为,裂解前,液氮研磨了下,且加了蛋白酶抑制剂(不知道是不是抑制降解的原因), 不知道为啥高分子量蛋白依然依然很少,请大家分析下啊

液氮研磨溶解的带型(加蛋白酶抑制剂)



剪碎溶解的带型(仅加PMSF)

19楼2011-10-25 11:17:22
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skyseaapple

铁虫 (小有名气)

LZ可以把裂解液直接拿来跑电泳,看看原来里面蛋白的情况,PMSF个人觉得问题不大,之前我做SDS-PAGE的时候,会跑一个全菌体,就是裂解之后不提取,直接电泳
20楼2011-10-26 14:07:27
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