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pidou213

木虫 (正式写手)

[求助] 毕赤酵母表达

毕赤酵母表达中
1\ 要求开始表达之前的起始浓度是OD600=1.0.请问这个浓度对其表达的影响到底有多大?
2\在我表达过程中,我发现酵母的浓度仅需要24h就已经很浓很浓了,是否还需要稀释呢?
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jingdejun

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
pidou213(金币+3): 2011-11-06 23:59:41
wanhscn(金币+2): 鼓励应助回帖 2011-11-08 09:03:22
引用回帖:
10楼: Originally posted by pidou213 at 2011-11-04 17:13:27:
请问你们用什么方法稀释到OD=1.0呢 毕竟感觉操作起来 好麻烦啊  并且还容意污染
所以想请叫 你们是怎么做的呢 ?、能详细描述一下吗? 谢谢啊

不好意思,遇到这种情况我都是重新接种。
所以怎么稀释我还真不知道,无非就是在无菌室里面用培养基(已灭菌)稀释吧。
要是浓度太大的话,可以只稀释一部分。也就是说舍弃一部分菌液,只稀释剩下的部分。或者把一瓶分成几瓶,再分别稀释。
当然稀释后还是要测OD啦,至于在稀释的过程中怎么控制OD的话,只有先靠肉眼观察(这个得有一定的经验哦)再实测了。

不过,我还是强烈建议重新接种吧。
11楼2011-11-05 00:16:27
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黎明星01

新虫 (初入文坛)

飘过,不过顶一下!
4楼2011-10-15 10:15:15
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pidou213

木虫 (正式写手)


wanhscn(金币+1): 如果没人发,金币可申请返还! 2011-11-08 09:02:41
没有人回复,让我这金币如何发啊???
见得多爱的多
6楼2011-10-30 00:37:33
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wt3532

木虫 (著名写手)

涛声依旧

【答案】应助回帖

★ ★
pidou213(金币+3): 2011-10-31 12:10:01
西瓜(金币+2): 鼓励应助 2011-11-01 17:44:05
这个应该1.0左右即可,即酵母繁殖到一定程度,有一定数量,不至于添加甲醇后表达蛋白而细胞不生在繁殖了。
24h后为什么需要稀释,感觉没必要。
7楼2011-10-30 02:10:30
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