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lishuihua

新虫 (初入文坛)

[求助] 检测枇杷叶提取物的熊果酸的含量时不出峰!!求高手指教!!

检测枇杷叶提取物的熊果酸的含量时不出峰!!!
方法如下:
流动相:甲醇-乙腈-0.4%磷酸(60:33:7)
流速:1mL/min
检测波长:205nm
色谱柱:wondasil   C18,长度150mm,内径4.6mm
温度:25摄氏度
样品:10mg/25mL,用甲醇超声至溶解
按照该方法做,出峰时间在11.8min左右,我是液相新手,第一次做这个方法,又没有师傅带,忘各位大侠不吝赐教!!
谢谢!!
附图






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yurong818

禁虫 (小有名气)

lishuihua(金币+5): 2011-10-12 22:23:49
本帖内容被屏蔽

2楼2011-10-11 15:32:16
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zhangsl112

木虫 (正式写手)

特级潜水员

【答案】应助回帖

★ ★
西湖醉鱼(金币+2): 新人鼓励奖 2011-10-11 22:05:53
你注意调整坐标,很有可能是含量比较低,熊果酸的峰很小,你坐标很大的话,就看不见峰咯!最好是进两针对照品看看。另外熊果酸前面还有个较小的峰是齐墩果酸,它们两是同分异构体,所以它们两个峰挨得很近,如果你只要熊果酸的峰的话,要注意它两的分离度,必要时可以通过降低洗脱强度和降低流速来提高它两分离度
初来乍到,请多关照
8楼2011-10-11 18:29:17
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jianhuilcn

金虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

★ ★
西湖醉鱼(金币+2): 新人鼓励奖 2011-10-11 22:06:14
我师妹以前好像也做个这个,流动相的条件对吗?
1. 其实没必要甲醇,乙腈都用吧,用其中一种就好了,
2. 另外你的有机溶剂:水的比例是93:7?熊果酸这应该极性比较强吧,怎么会用这么强洗脱能力的溶剂?我猜用90%的水还差不多吧?
3. 最后同7楼的,纵坐标太大了,跳到100mv看看有峰没有
9楼2011-10-11 21:30:12
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普通回帖

xf000936

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

为什么在你的图上看到的压力都是0.0?
忙啊~~~~
3楼2011-10-11 15:38:32
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朱亚娟

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

压力显示为0,是不是没有开泵啊~如果开泵走流动相,肯定会有压力的~另外你的谱图有倒峰,会不会是检测器的极性接反了,或者是检测器的进出口接反了~一点愚见,你试试吧
4楼2011-10-11 16:12:07
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lishuihua

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by xf000936 at 2011-10-11 15:38:32:
为什么在你的图上看到的压力都是0.0?

这个是软件上没显示,仪器上显示的是10Mp左右
5楼2011-10-11 17:11:09
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lishuihua

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 朱亚娟 at 2011-10-11 16:12:07:
压力显示为0,是不是没有开泵啊~如果开泵走流动相,肯定会有压力的~另外你的谱图有倒峰,会不会是检测器的极性接反了,或者是检测器的进出口接反了~一点愚见,你试试吧

开了泵的,这个是软件上没显示,仪器上显示的是10Mp左右,有跳动。
6楼2011-10-11 17:12:54
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lishuihua

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yurong818 at 2011-10-11 15:32:16:
1.确认你的样品有没有问题,是否为标准物质?
2.样品溶液没有问题了,再确认进样器是否有问题?样品是否真的进仪器了
看谱图的样子,检测器好像没有问题
一点愚见,你试试吧

样品送别人公司检测过,是25%的熊果酸,我现在做的方法也是这家公司的。你说可能是进样器的问题,看来得拆下来超声一下。谢谢!
7楼2011-10-11 17:16:07
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xibeifeng01

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 朱亚娟 at 2011-10-11 16:12:07:
压力显示为0,是不是没有开泵啊~如果开泵走流动相,肯定会有压力的~另外你的谱图有倒峰,会不会是检测器的极性接反了,或者是检测器的进出口接反了~一点愚见,你试试吧

压力为零是不是purge阀没有拧紧啊,还有就是检测器接反与否和倒峰没有关系。你是手动进样吧,那么是不是进样阀没有搞清楚,样品没有进到柱子里。另外可以看一下公司做的色谱图么?
西北风
10楼2011-10-11 21:57:11
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