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生物素活化步骤？
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大家好~~~ 本人在做有关生物素标记抗体，首先需要将生物素活化。 我们用的生物素是sigma公司的B4501的生物素，需制成NHS-Biotin，请各位高手提供一下详细的实验步骤，以及NHS-Biotin与抗体标记的步骤，不胜感谢。 请写明所查资料的出处，谢谢！ |
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luoyan2006
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帮顶！！！不懂！！！ 5楼2011-10-13 15:02:16
yuguanggui
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6楼2011-10-14 16:43:30
喵汪
银虫 (小有名气)
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- 注册: 2009-09-19
- 性别: MM
- 专业: 电化学分析
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跟楼主同感。 手头有一篇，还没试。Electrogenerated Chemiluminescence. 80. C-Reactive Protein Determination at High Amplification with [Ru(bpy)3]2+-Containing Microspheres，supporting information里的: Biotinylation of Anti-CRP. Briefly, ~4.5 mg of sulfo-NHS-LC-biotin was added to 1 mL of ~ 90 mg/mL anti-CRP PBS solution (pH 7.2), and the reaction was allowed to proceed for ~30 min at room temperature. Free biotin molecules were subsequently removed by a Sephadex G-25 PD-10 desalting column (Amersham Pharmacia Biotech, Piscataway, NJ). The final product with a concentration of ~15 mg biotinylated anti-CRP/mL in PBS (pH 7.2) was stored at ~4 ?C prior to use. |
7楼2011-10-28 11:27:33
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