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萌1986

新虫 (初入文坛)

[求助] 生物素活化步骤?

大家好~~~
本人在做有关生物素标记抗体,首先需要将生物素活化。
我们用的生物素是sigma公司的B4501的生物素,需制成NHS-Biotin,请各位高手提供一下详细的实验步骤,以及NHS-Biotin与抗体标记的步骤,不胜感谢。
请写明所查资料的出处,谢谢!
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luoyan2006

铁杆木虫 (著名写手)

这个应该可以查到文献的吧
2楼2011-10-09 19:39:14
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萌1986

新虫 (初入文坛)

网上的版本太多,每种都不一样,现在也不知道哪一种比较合适~~~
3楼2011-10-10 09:18:37
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萌1986

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
1楼: Originally posted by 萌1986 at 2011-10-09 15:20:38:
大家好~~~
本人在做有关生物素标记抗体,首先需要将生物素活化。
我们用的生物素是sigma公司的B4501的生物素,需制成NHS-Biotin,请各位高手提供一下详细的实验步骤,以及NHS-Biotin与抗体标记的步骤,不胜感谢 ...

网上版本太多,都不太一样,不知道哪一种比较合适~
4楼2011-10-10 09:19:36
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YINJIA-E2

新虫 (初入文坛)

帮顶!!!不懂!!!
5楼2011-10-13 15:02:16
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yuguanggui

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 鼓励交流~ 2011-10-14 19:39:55
萌1986(金币+3): 2011-10-15 11:01:26
有商品化的NHS-Biotin,还可以根据需要选择链的长度。
自己活化的话就是DCC/NHS就可以
yu
6楼2011-10-14 16:43:30
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喵汪

银虫 (小有名气)

跟楼主同感。
手头有一篇,还没试。Electrogenerated Chemiluminescence. 80. C-Reactive Protein Determination at High Amplification with [Ru(bpy)3]2+-Containing Microspheres,supporting information里的:
Biotinylation of Anti-CRP. Briefly, ~4.5 mg of sulfo-NHS-LC-biotin was added to 1 mL of ~ 90 mg/mL anti-CRP PBS solution (pH 7.2), and the reaction was allowed to proceed  for  ~30  min  at  room  temperature.  Free  biotin  molecules  were  subsequently removed by a Sephadex G-25 PD-10 desalting column  (Amersham Pharmacia Biotech, Piscataway,  NJ).  The  final  product  with  a  concentration  of  ~15 mg  biotinylated  anti-CRP/mL in PBS (pH 7.2) was stored at ~4 ?C prior to use.
7楼2011-10-28 11:27:33
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