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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酶切以后没有条带
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他她0328

银虫 (小有名气)

[求助] 酶切以后没有条带

随机酶切后0.5%的琼脂糖凝胶电泳检测，一点条带都没有，请问是怎么回事？
酶切体系： gDNA      10微克
           10 × buffer       40微升
           酶            1 U
                   双蒸水     至 400微升
37℃水浴30min。
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1楼 2011-10-09 13:37:18
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XI4ZHL

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
22楼: Originally posted by 他她0328 at 2011-10-16 09:33:03:
文献上都是这样的方案，这样不行的话我应该怎样改进？

我不知道，你的gdna是啥，我用的是质粒，我是做了对照，一个双酶切，两个酶分别单酶切，然后跑电泳，单酶切的跑的快，还有就是涂板鉴定，一定要用大反应体系，我的是40 ，载体加了20 ，你自己在摸索一下吧！祝好运！
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心，是用来使用的，不能搁浅！
23楼2011-10-17 08:39:47
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yuxia82012

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
他她0328(金币+1): 2011-10-09 17:00:31
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-10-10 17:16:22
为什么要搞这么大的体系？还有你照胶时用EB染色没？再有就是可能切碎了，浓度又低，就看不出来了
赞一下(1人) 回复此楼
在等待中涅槃重生
2楼2011-10-09 13:51:31
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asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

这么大体系……可能是太稀了吧
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显微镜下的世界很精彩！
3楼2011-10-09 14:03:38
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amilie030312

金虫 (正式写手)
1U的酶你用400微升的体系，没搞懂要做啥
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4楼2011-10-09 14:33:08
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