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他她0328

银虫 (小有名气)

[求助] 酶切以后没有条带

随机酶切后0.5%的琼脂糖凝胶电泳检测,一点条带都没有,请问是怎么回事?
酶切体系: gDNA      10微克
           10 × buffer       40微升
           酶            1 U
                   双蒸水     至 400微升
37℃水浴30min。
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XI4ZHL

铜虫 (著名写手)

引用回帖:
22楼: Originally posted by 他她0328 at 2011-10-16 09:33:03:
文献上都是这样的方案,这样不行的话我应该怎样改进?

我不知道,你的gdna是啥,我用的是质粒,我是做了对照,一个双酶切,两个酶分别单酶切,然后跑电泳,单酶切的跑的快,还有就是涂板鉴定,一定要用大反应体系,我的是40 ,载体加了20 ,你自己在摸索一下吧!祝好运!
心,是用来使用的,不能搁浅!
23楼2011-10-17 08:39:47
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yuxia82012

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


他她0328(金币+1): 2011-10-09 17:00:31
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-10-10 17:16:22
为什么要搞这么大的体系?还有你照胶时用EB染色没?再有就是可能切碎了,浓度又低,就看不出来了
在等待中涅槃重生
2楼2011-10-09 13:51:31
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asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

这么大体系……可能是太稀了吧
显微镜下的世界很精彩!
3楼2011-10-09 14:03:38
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amilie030312

金虫 (正式写手)

1U的酶你用400微升的体系,没搞懂要做啥
4楼2011-10-09 14:33:08
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