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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酶切请教
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madengyu

禁虫 (小有名气)
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1楼 2011-10-04 22:10:34
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红多多

木虫 (正式写手)

版筑饭牛的日子
★ ★
1949stone(金币+2): 测序可以 2011-10-04 22:32:11
我也出现过这种情况，下面有一条带，不知道是什么东西。不过一般情况下是连接成功了，如果你是做表达的话建议你测序，读码框错了会哭的……
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可以用QQ找我……
2楼2011-10-04 22:29:24
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guojianping

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励应助！ 2011-10-05 17:32:25
建议PCR验证下，对的话送测序，个人觉得问题不大，应该对的
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3楼2011-10-05 08:43:21
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

★ ★ ★
wanhscn(金币+3): Good！ 2011-10-05 17:32:33
1：首先标注marker
2：可以进行双酶切的同时，进行一下单酶切，再点个对照（就是空载体的单酶切或者双酶切）
3：看看你载体上或者基因上同样的酶切位点没有有两个。。。如果有，那就悲剧了。。。
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
4楼2011-10-05 09:31:26
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cuiyoutian88

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励应助！ 2011-10-05 17:32:43
分别单酶切试试，再来对照。。要不然只能去测序了。
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5楼2011-10-05 11:22:14
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256k

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励应助！ 2011-10-05 17:32:52
廉价酶单酶切连接物和空载体，条带不一致表明连接成功；再测序验证插入序列是否正确
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6楼2011-10-05 15:51:31
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youngker918

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

madengyu(金币+2): 2011-10-07 09:18:22
建议你仔细检查你插入片段和载体上插入位点的上下游，可能还有一个你所用的内切酶的酶切位点
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天才就怕不够天才，坏又不够坏，天天都想离开，却不知何处才能换骨脱胎
7楼2011-10-06 16:59:54
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香凝冷星

银虫 (小有名气)
不太懂
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8楼2011-10-08 15:19:33
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