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little-ant

新虫 (小有名气)

[求助] 我的药HPLC对称因子总是不满足药典要求,求助各位大侠指教一下!拜托!

我是新手,刚接触hplc,在摸索一个自己实验室合成的新药(单一化合物)的液相条件,C18色谱柱,样品用纯甲醇溶,流动相甲醇-水,1ml/min,但出现主峰分叉的情况,不要预柱测的话峰不分叉但峰都前沿,换别的柱子后(有接预柱)没有出现峰分叉,请问这些情况是否说明我的柱子柱头污染或塌陷导致的峰分叉???另外我用流动相溶解样品后测,峰型改善很多,无分叉或肩峰现象,但对称因子不满足要求,试过在流动相中加酸或盐,无论样品用纯甲醇溶还是用流动相溶,都还是得不到满意结果,请各位大侠说说我该怎么办呀,跪求各位的建议啊!小弟拜谢了!!
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copydog

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


wtf66(金币+1): 谢谢参与 2011-09-30 23:24:23
弱弱的问一下,药典要求是指以峰高计算含量时才要求对称因子在0.95-1.05吧,如果用峰面积计算应该没那么严格
3楼2011-09-30 23:15:36
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大根草

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
wtf66(金币+3): 谢谢参与 2011-09-30 23:23:59
little-ant(金币+1): 2011-10-01 01:07:30
1)首先你要确定,你所测得化合物是否真的是一纯的单一化合物
2)如果纯化合物的话,可不用预柱
3)以苯的甲醇溶液做试验样品,用的甲醇水(比例可在40-60%之间调节,使保留时间在15-20分钟左右),看看苯的峰是否分叉,如果也分叉,则说明你的柱子有问题,如果苯不分叉,则可能是你的样品或流动相体系有问题。
4)对称因子,可根据样品的性质(酸、碱等),调节流动相可以改善。
2楼2011-09-30 22:56:49
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copydog

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

弱弱的问一下,药典要求是指以峰高计算含量时才要求对称因子在0.95-1.05吧,如果用峰面积计算应该没那么严格
4楼2011-09-30 23:16:50
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ronzelau

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


karl2100(金币+1): 3Q 2011-10-01 20:36:06
karl2100:编辑内容 2011-10-01 20:36
1、你这个情况应该是保护住脏了,建议更换柱芯。
2、关于对称因子,外标法测定含量时尽量做到0.95-1.05的要求,根据化合物结构加入合适的添加剂可以解决不对称的问题,或者改用封端色谱柱。
3.你说的合成药物的液相条件,估计是测定有关物质,可以不必死守0.95-1.05之规定。专属性才最重要,但也与对称因子相关。

[ Last edited by karl2100 on 2011-10-1 at 20:36 ]
事在人为!
5楼2011-10-01 00:09:43
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