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紫薇花开

新虫 (正式写手)

[求助] 将壳聚糖制成支架材料后怎么除菌,细胞试验怎么做?

我想做将脱乙酰度95%的壳聚糖通过冻干制成多孔的支架材料,种细胞前需要除菌,我看文献的除菌过程是将支架材料分别浸没在70%、50%、25%的乙醇中除菌并使材料水合,然后再用PH=7.4的PBS平衡支架的PH, 我的问题是着每个步骤大概需要多长时间,即将材料分别泡在70%、50%、25%,和PH=7.4的PBS的溶液中大概需要多长时间?
还有一个问题就是我如果将材料切成大小10*10*2mm3大小的话用来做内皮细胞的粘附,迁移,增殖一般要种多少细胞?谢谢!!!
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紫薇花开

新虫 (正式写手)

再请教个问题,多孔壳聚糖用乙醇除菌的话,会不会缩的很厉害?你们在三维支架材料上的细胞增殖是怎么做的?急需帮助!谢谢!!!
3楼2011-09-27 12:08:57
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injectable

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


紫薇花开(金币+5): 还有个问题,请教,乙醇除菌时,壳聚糖多孔支架材料会缩的很厉害吗? 2011-09-27 12:28:04
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-09-28 08:56:37
70%、50%、25%,各2小时
PBS,3次,前两次各2小时,第3次过夜
做细胞的话,种植密度因人而异。50-300万都可以的吧
1.保持体型,切不可肚肥肠圆而失叫兽形象;2.笔耕不辍,每两月要投一篇文章。
2楼2011-09-27 11:38:31
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archibold

金虫 (初入文坛)


lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-09-28 08:56:47
如果有条件的话建议伽马射线辐照灭菌
支架不会有任何变形,灭菌效果也很好
4楼2011-09-27 16:02:30
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injectable

木虫 (著名写手)


lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-09-28 08:57:07
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2012-02-22 00:08:15
引用回帖:
3楼: Originally posted by 紫薇花开 at 2011-09-27 12:08:57:
再请教个问题,多孔壳聚糖用乙醇除菌的话,会不会缩的很厉害?你们在三维支架材料上的细胞增殖是怎么做的?急需帮助!谢谢!!!

会有收缩的。
做过壳聚糖海绵状支架的细胞种植
用注射器注射种植
或用镊子挤压支架 再放到细胞悬浮液中松开镊子 令其将细胞吸入支架
增殖的话 要测DNA
1.保持体型,切不可肚肥肠圆而失叫兽形象;2.笔耕不辍,每两月要投一篇文章。
5楼2011-09-27 17:08:39
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