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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 高分子生物材料 » 将壳聚糖制成支架材料后怎么除菌，细胞试验怎么做？
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紫薇花开

新虫 (正式写手)

[求助] 将壳聚糖制成支架材料后怎么除菌，细胞试验怎么做？

我想做将脱乙酰度95%的壳聚糖通过冻干制成多孔的支架材料，种细胞前需要除菌，我看文献的除菌过程是将支架材料分别浸没在70%、50%、25%的乙醇中除菌并使材料水合，然后再用PH=7.4的PBS平衡支架的PH， 我的问题是着每个步骤大概需要多长时间，即将材料分别泡在70%、50%、25%，和PH=7.4的PBS的溶液中大概需要多长时间？
还有一个问题就是我如果将材料切成大小10*10*2mm3大小的话用来做内皮细胞的粘附，迁移，增殖一般要种多少细胞？谢谢！！！
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1楼 2011-09-27 11:17:13
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injectable

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
紫薇花开(金币+5): 还有个问题，请教，乙醇除菌时，壳聚糖多孔支架材料会缩的很厉害吗？ 2011-09-27 12:28:04
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-09-28 08:56:37
70%、50%、25%，各2小时
PBS，3次，前两次各2小时，第3次过夜
做细胞的话，种植密度因人而异。50-300万都可以的吧
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1.保持体型，切不可肚肥肠圆而失叫兽形象；2.笔耕不辍，每两月要投一篇文章。
2楼2011-09-27 11:38:31
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紫薇花开

新虫 (正式写手)
再请教个问题，多孔壳聚糖用乙醇除菌的话，会不会缩的很厉害？你们在三维支架材料上的细胞增殖是怎么做的？急需帮助！谢谢！！！
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3楼2011-09-27 12:08:57
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archibold

金虫 (初入文坛)
★
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-09-28 08:56:47
如果有条件的话建议伽马射线辐照灭菌
支架不会有任何变形，灭菌效果也很好
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4楼2011-09-27 16:02:30
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injectable

木虫 (著名写手)
★
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-09-28 08:57:07
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2012-02-22 00:08:15
引用回帖:
3楼: Originally posted by 紫薇花开 at 2011-09-27 12:08:57:
再请教个问题，多孔壳聚糖用乙醇除菌的话，会不会缩的很厉害？你们在三维支架材料上的细胞增殖是怎么做的？急需帮助！谢谢！！！

会有收缩的。
做过壳聚糖海绵状支架的细胞种植
用注射器注射种植
或用镊子挤压支架 再放到细胞悬浮液中松开镊子 令其将细胞吸入支架
增殖的话 要测DNA
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1.保持体型，切不可肚肥肠圆而失叫兽形象；2.笔耕不辍，每两月要投一篇文章。
5楼2011-09-27 17:08:39
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紫薇花开

新虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by injectable at 2011-09-27 17:08:39:
会有收缩的。
做过壳聚糖海绵状支架的细胞种植
用注射器注射种植
或用镊子挤压支架 再放到细胞悬浮液中松开镊子 令其将细胞吸入支架
增殖的话 要测DNA

向您请教一下啊，增殖的话支架里的DNA怎么测啊！
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6楼2011-09-27 17:57:45
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白开水女孩

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 紫薇花开 at 2011-09-27 17:57:45:
向您请教一下啊，增殖的话支架里的DNA怎么测啊！

可以直接做MTT的吧
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没有最好，自由更好
7楼2011-09-28 11:08:44
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gw1203

新虫 (初入文坛)
高压蒸汽消毒！
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8楼2012-02-20 18:15:06
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lixiangde

荣誉版主 (著名写手)

将军
高分子的高温灭菌可能不行，我们都是伽马射线辐照灭菌
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有梦就有希望！
9楼2012-02-20 22:47:10
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gw1203

新虫 (初入文坛)
高压蒸汽灭菌后材料的FITR实验没有改变！
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10楼2012-02-21 16:54:59
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