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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 碘量法测定淀粉酶活性的问题
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liouwzh

木虫 (正式写手)

[求助] 碘量法测定淀粉酶活性的问题

做细菌淀粉酶活性测定时，发酵上清液与0.5%的可溶性淀粉在55摄氏度反应10min后加入硫酸终止反应。取0.5ml反应液与5ml稀碘液显色，在OD620处测光密度。但是发现有几个样品的OD值竟然比未添加酶液的空白对照的样品的OD值，想不通是什么原因。
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1楼 2011-09-22 16:40:42
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huxiao_hua

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by wuyuan1992 at 2012-04-27 00:28:47
我最近在做碘法测定淀粉酶的活力，也是出现了类似的状况，匪夷所思。空白的OD值最低，对照的次之，反应的最高。跟原本想象中结果完全相反，非常困惑。不知道楼主有没有弄清楚究竟是什么原因，可不可以分享交流一下。

我也在做淀粉酶抑制剂活力测定，也是发生对照组的OD值低于反应组的OD,理论上是不可能的呀，后来做实验，解决了吗？原理是什么呢？我也是加入碘和碘化钾溶液
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15楼2016-08-12 09:32:49
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魏小勇2011

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

你应该说清楚点啊，这叫人如何帮你？？
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学习学习
2楼2011-09-22 21:17:18
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liouwzh

木虫 (正式写手)
不好意思，落了几个字。
做细菌淀粉酶活性测定时，发酵上清液与0.5%的可溶性淀粉在55摄氏度反应10min后加入硫酸终止反应。取0.5ml反应液与5ml稀碘液显色，在OD620处测光密度。但是发现有几个样品的OD值竟然比未添加酶液的空白对照的样品的OD值高，这是否是说明淀粉并没有被酶解反而淀粉含量增加了还是说有其他原因？
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3楼2011-09-23 10:17:43
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魏小勇2011

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
liouwzh(金币+2): 多谢 2011-09-23 14:17:40
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-09-25 20:07:53
首先要确定碘液是否摇匀，还有就是操作错误？再有就是光波长，我看到的资料怎么是在660nm下测吸光度的。。。希望对你有帮助。。谢谢！
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学习学习
4楼2011-09-23 12:11:38
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