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yilishanshan

木虫 (正式写手)

大星星

[求助] HPLC中流动相的pH问题?

弱弱地问,HPLC中,流动相若用磷酸调pH值至4,调过了,pH到3了,怎么办?用NaOH滴加中和吗?一般多少浓度的NaOH?
HPLC实验中,流动相的pH影响大吗?
流动相中加入乙酸钠,用冰醋酸调pH;而流动相中加入磷酸二氢钾,用磷酸调pH,是要缓冲盐和对应的酸一起吗?若流动相中加入磷酸盐,是不是只能用磷酸调pH,不能用盐酸、冰醋酸?
恳请高手赐教,感激不尽!
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主


karl2100(金币+1): 3Q 2011-09-27 23:33:58
引用回帖:
19楼: Originally posted by yilishanshan at 2011-09-27 19:38:10:
若pH主要是影响保留时间,那所用流动相pH不是标准规定的值,但在柱子能承受的范围内,对照和样品用同一流动相,保留时间变了,有什么关系呢?

不太明白你的意思。
同一流动相中,对照和样品保留时间发生变化,排除对照及样品质量上变化的原因外,可能与流动相的变化(如有机溶剂蒸发)而致使的流动相极性、pH的变化,从而导致保留时间发生变化,也可能是柱温没有控制,随室温变化而变化。
守候在风中的宁静。
27楼2011-09-27 21:51:18
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
jiangchunyong(金币+2): 谢谢应助!欢迎常来! 2011-09-20 08:36:49
yilishanshan(金币+5): 谢谢,若P 2011-09-27 19:33:15
pH影响的大小,主要取决于样品酸碱性。样品中性,基本没啥影响,样品酸碱性,对保留时间影响较大,流动相pH在样品pKa正负1范围内变化,保留时间变化最大。

酸盐以对应的酸调pH,能形成较稳定的pH缓冲体系,若流动相有蒸发沉淀等变化,不至于流动相pH变化太大而造成保留时间发生变化。当然,以磷酸盐为例,若以盐酸、醋酸等调pH,亦未尝不可。

返调pH 的问题。理论上,是可以的。引入少量的盐,一般不会对峰型等造成加大的影响。浓度,随意。
守候在风中的宁静。
2楼2011-09-20 08:26:26
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xiaoxiazizx

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


novus(金币+1): 谢谢交流,欢迎常来药学版! 2011-09-20 18:58:27
最好重新另配缓冲液,因为流动相最好不要含有过多盐的成分,对柱子损伤很大。而且柱子的pH使用范围是一定的。流动相中加入磷酸盐,最好用磷酸调啊,否则引入其他的杂质
刻意去找的东西,往往是找不到的。天下万物的来和去,都有他的时间。
3楼2011-09-20 09:51:29
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lxh729

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


jiangchunyong(金币+1): 谢谢应助!欢迎常来! 2011-09-20 16:52:20
HPLC中,流动相若用磷酸调pH值至4,调过了,pH到3,若是对浓度要求不是很严格,且现在的浓度还不是很大,可用磷酸氢二钾或磷酸氢二钠调,一般不用氢氧化钠来调,最好让水相形成缓冲盐。
4楼2011-09-20 11:22:00
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