24小时热门版块排行榜    

查看: 5196  |  回复: 41
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

yilishanshan

木虫 (正式写手)

大星星

[求助] HPLC中流动相的pH问题?

弱弱地问,HPLC中,流动相若用磷酸调pH值至4,调过了,pH到3了,怎么办?用NaOH滴加中和吗?一般多少浓度的NaOH?
HPLC实验中,流动相的pH影响大吗?
流动相中加入乙酸钠,用冰醋酸调pH;而流动相中加入磷酸二氢钾,用磷酸调pH,是要缓冲盐和对应的酸一起吗?若流动相中加入磷酸盐,是不是只能用磷酸调pH,不能用盐酸、冰醋酸?
恳请高手赐教,感激不尽!
回复此楼
去做自己想做的
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

News

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖


karl2100(金币+1): 谢谢! 2011-09-27 23:35:15
流动相之所以选择磷酸盐(钾盐、钠盐)缓冲体系,是因为磷酸盐缓冲液可以提供稳定的pH环境,利于分离。再者钾离子、钠离子皆有饱和柱子的活性中心,避免分析物质与活性中心结合,造成峰拖尾,变宽。其中钾离子的作用强于钠离子。
pH调过了,用一点的氢氧化钠也可以,因为只要在磷酸盐的缓冲范围内,一点改变对于整个系统是没什么影响的。这只是一般情况,特殊情况特殊考虑。
如果流动相里有磷酸最好还是别加醋酸,两者的缓冲范围不太一样,(两个缓冲系统),这个和上面的氢氧化钠不同。
水滴石穿!!
16楼2011-09-23 16:23:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 42 个回答

痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
jiangchunyong(金币+2): 谢谢应助!欢迎常来! 2011-09-20 08:36:49
yilishanshan(金币+5): 谢谢,若P 2011-09-27 19:33:15
pH影响的大小,主要取决于样品酸碱性。样品中性,基本没啥影响,样品酸碱性,对保留时间影响较大,流动相pH在样品pKa正负1范围内变化,保留时间变化最大。

酸盐以对应的酸调pH,能形成较稳定的pH缓冲体系,若流动相有蒸发沉淀等变化,不至于流动相pH变化太大而造成保留时间发生变化。当然,以磷酸盐为例,若以盐酸、醋酸等调pH,亦未尝不可。

返调pH 的问题。理论上,是可以的。引入少量的盐,一般不会对峰型等造成加大的影响。浓度,随意。
守候在风中的宁静。
2楼2011-09-20 08:26:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoxiazizx

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


novus(金币+1): 谢谢交流,欢迎常来药学版! 2011-09-20 18:58:27
最好重新另配缓冲液,因为流动相最好不要含有过多盐的成分,对柱子损伤很大。而且柱子的pH使用范围是一定的。流动相中加入磷酸盐,最好用磷酸调啊,否则引入其他的杂质
刻意去找的东西,往往是找不到的。天下万物的来和去,都有他的时间。
3楼2011-09-20 09:51:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxh729

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


jiangchunyong(金币+1): 谢谢应助!欢迎常来! 2011-09-20 16:52:20
HPLC中,流动相若用磷酸调pH值至4,调过了,pH到3,若是对浓度要求不是很严格,且现在的浓度还不是很大,可用磷酸氢二钾或磷酸氢二钠调,一般不用氢氧化钠来调,最好让水相形成缓冲盐。
4楼2011-09-20 11:22:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +3 启萌科技 2026-08-12 11/550 2026-08-13 22:57 by 启萌科技
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
信息提示
请填处理意见