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冷雁孤旅

木虫 (著名写手)

引用回帖:
16楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-09-22 16:08:28
我以为你说的是跑电泳的上样量……模板量的调整当然ok……...

版主啊  我最近在做半定量PCR 可是 最近 内参亮度不一样 要慢慢调整  可是有什么办法可以使得最快调整下来么?急@西瓜
生命不息奋斗不止
21楼2014-05-18 17:11:57
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wangpeng227

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

问这个问题的同学还挺多

1. 提取的RNA要测定浓度,然后稀释到一致的浓度
2. 反转录用等量的RNA(之所以稀释RNA,是为了在反转录时减小加样误差,你加1uL和加5uL,同样0.2uL的误差,百分比就差的很多了)
3. PCR时取等量的cDNA(可以稀释一下cDNA,增加加样体积,减少误差)

要注意PCR仪的扩增效率,如果PCR仪各孔之间的效率差很多的话,需要先校正PCR仪。
22楼2014-05-18 20:16:18
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匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
23楼2014-05-19 00:13:05
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