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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR 总是呈现涂抹状 求解答！
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] PCR 总是呈现涂抹状 求解答！ 已有16人参与

最近做pcr 总是呈现这种涂抹状，原来一直以为是用的taq 酶 mix 没有反应完所致 ，今天专门点了两个孔的 mix 结果泳道是干净的 也不知道这样的抹带究竟是什么原因造成的 请做PCR 经验丰富的朋友指点  电泳图片 就这样的


有时候p 出来 也会有这种抹带的样子
照片这样的



[ Last edited by 老夏853 on 2011-9-14 at 18:00 ]
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1楼 2011-09-14 17:17:15
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
31楼: Originally posted by lingonghua at 2011-09-18 17:40:32:
引物有没有问题？
我这两天做PCR，开始能扩出来，后来优化完善体系的时候反而扩不出来了。然后把原先备份的引物粉末重新溶解稀释，就又能扩出来了。

另一个是dNTP，我的40微升体系，一开始用4微升扩不出来，减 ...

这个 引物我当初合成的时候2OD 分装两管 发现做不出来的时候 我另一管也用了 依然做不出来
你说那个DNTP,我们用的是混合好的mix  里面的dntp 各是0.4mM  ~~
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32楼2011-09-18 20:29:59
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小鸟剑客

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
是不是跑电泳的问题啊，
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2楼2011-09-14 19:19:39
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★ ★
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wanhscn(金币+2): 同意！ 2011-09-15 08:49:04
pcr体系不太合适。。。。
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-09-14 20:30:03
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cloverplm

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+2): 四叶草MM很活跃哦 2011-09-14 22:19:34
一个个排除吧！胶，电泳条件（电压，缓冲液，电泳时间等）， 引物，PCR条件等。另外你加样的时候要注意下，有不少挂孔的啊！
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净——静——竞——进
4楼2011-09-14 20:30:53
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