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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于菌株筛选
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flyhbsa002

新虫 (小有名气)

[求助] 关于菌株筛选

有没有做产木聚糖酶菌株筛选的童鞋呢？想请教一下，除了用刚果红染色筛菌外，还有其他可选择的产透明圈的方法吗？因为我的木聚糖是水溶性的，所以必须要借助一种染色剂或者其他什么试剂才可以产透明圈。求教啊！
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1楼 2011-09-14 09:23:23
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ASHY_a

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

查文献只看到刚果红染色剂。
可以用不溶性的木聚糖，颗粒大一点的，燕麦木聚糖、玉米芯木聚糖（200目）
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flyhbsa002
不懂，确实不懂
2楼2011-09-14 18:07:19
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mche2005

木虫 (正式写手)

7-5-3

【答案】应助回帖

我也准备做木聚糖酶筛选。
文献上说，其实也可以不用刚果红染色。因为，木聚糖被利用后，还是有很明显的透明圈的。
看来，楼主没看几篇中文文献哪！
利用刚果红染色木聚糖的文献只有寥寥两三篇。而直接用木聚糖水解圈的文献至少五六篇。其他的还有用蓝色的染色剂染色的木聚糖。
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3楼2011-09-14 18:36:52
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flyhbsa002

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by mche2005 at 2011-09-14 18:36:52:
我也准备做木聚糖酶筛选。
文献上说，其实也可以不用刚果红染色。因为，木聚糖被利用后，还是有很明显的透明圈的。
看来，楼主没看几篇中文文献哪！
利用刚果红染色木聚糖的文献只有寥寥两三篇。而直接用木聚糖 ...

不是啦，我买的木聚糖是国产的，水溶性的。培养基本身就是透明的，所以就看不到木聚糖被利用后的透明圈。
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4楼2011-09-15 14:43:23
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flyhbsa002

新虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by ASHY_a at 2011-09-14 18:07:19:
查文献只看到刚果红染色剂。
可以用不溶性的木聚糖，颗粒大一点的，燕麦木聚糖、玉米芯木聚糖（200目）

纯燕麦木聚糖断货。自己提取的玉米芯的木聚糖，可是透明圈不是很明显
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5楼2011-09-15 14:44:27
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ASHY_a

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by flyhbsa002 at 2011-09-15 14:44:27:
纯燕麦木聚糖断货。自己提取的玉米芯的木聚糖，可是透明圈不是很明显

适量提高木聚糖浓度，使平板的不透明度增大，即可易于观察透明圈。

除了木聚糖溶解度大造成透明圈不明显的原因外，还有可能是是采样中没有木聚糖酶菌，或者其木聚糖酶活性较低。换个自然环境取样，稻田里、枯树旁等
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不懂，确实不懂
6楼2011-09-16 13:25:53
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禾古乃曰

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

小女子要筛选产褐藻胶裂解酶的高产菌株，想请教以下几个问题
    1 ：如果我直接从长菌的海带上取菌 稀释后涂平板的话还用富集培养吗？
    2  ：种子培养一般培养几天我是培养了两天。
    3  现在我发现有好多种培养基配方，初筛培养基(NH4)2SO4   0.5g，K2HPO4  0.2g，NaCl  3.0g， MgSO4•7H2O  0.1g，褐藻酸钠 0.5g，琼脂 1.3g，pH 7.5，100mL 水配制。复筛培养基 (NH4)2SO4 0.5g, 酵母提取物 0.1g, 褐藻酸钠0.5g, NaCl 3.0g另外一种的初筛培养基是2216E。不知用哪种好？
   4  DNS法测的酶活  通过测降解产物的吸光度A来计算， 但是我还真不太清楚怎么算？
   5  最后A和OD值有什么不同啊？
  那位大侠给小女子指点指点吧！万分感谢
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7楼2013-06-20 15:49:41
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