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mexes

铁虫 (小有名气)

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[求助] Lowry法定量蛋白质含量

最近买了上海生工的Lwory法蛋白质定量试剂盒，可是做标准曲线的时候发现，有些点的吸光值很不稳定，不知道是什么原因？做的过程也是严格按照说明书进行，时间也是精确把握的，请各位前辈赐教！谢谢！

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1楼 2011-09-14 00:42:25

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lhczj

金虫 (小有名气)

BioEPI: 2
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专业: 生物技术药物

【答案】应助回帖

adslye(BioEPI+1): 很好！ 2011-09-14 15:49:27
mexes(金币+4): 谢谢，已经放弃了此方法 2011-09-14 16:46:35

通常来讲Lowry法定量准确度较低，原因如下，一、因为标准品通常为BSA，起关键作用的氨基酸组成并不一致，会导致偏差。二、缓冲液组成及pH不同会影响显色效果，Lowry反应较佳在pH8.0左右，具体记不清了，而在偏酸性环境下显色会较浅，按照公式计算浓度会低。如果有条件还是要用液相比较准确，如果条件不允许可以尽量避免上述条件的不一致，采用液相定量后的工作标准品做标准曲线，尽量用同样的缓冲液稀释样品，不知道能不能帮助到你。