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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » Lowry法定量蛋白质含量
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mexes

铁虫 (小有名气)

[求助] Lowry法定量蛋白质含量

最近买了上海生工的Lwory法蛋白质定量试剂盒，可是做标准曲线的时候发现，有些点的吸光值很不稳定，不知道是什么原因？ 做的过程也是严格按照说明书进行，时间也是精确把握的，请各位前辈赐教！谢谢！
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1楼 2011-09-14 00:42:25
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银杏下

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-09-14 12:37:56
mexes(金币+2): 我现在只是做标准曲线，用的全是他们的试剂，应该不是这个原因 2011-09-14 14:55:44
lowry法测定时样品中不能含有SDS，如果含有SDS可能测得的吸光值就不准确了
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2楼2011-09-14 11:36:17
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xhjggl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

mexes(金币+1): 2011-09-14 14:56:59
样品中含有杂质。
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3楼2011-09-14 14:01:18
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辉辉集团

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

mexes(金币+2): 唉，搞得我现在都不相信了，第一次用居然这样 2011-09-14 14:56:45
本人一般都不相信试剂盒的 呵呵
简单是简单了点 但是数据经常不准确的
我上次测SOD酶活 试剂盒测测普通的缓冲液酶活都能有好几千
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4楼2011-09-14 14:52:38
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辉辉集团

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

测蛋白浓度的方法有很多 要不你换个吧
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5楼2011-09-14 14:52:57
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mexes

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xhjggl at 2011-09-14 14:01:18:
样品中含有杂质。

我现在只是做标准曲线，还没到那一步
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6楼2011-09-14 14:56:11
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lhczj

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

adslye(BioEPI+1): 很好！ 2011-09-14 15:49:27
mexes(金币+4): 谢谢，已经放弃了此方法 2011-09-14 16:46:35
通常来讲Lowry法定量准确度较低，原因如下，一、因为标准品通常为BSA，起关键作用的氨基酸组成并不一致，会导致偏差。二、缓冲液组成及pH不同会影响显色效果，Lowry反应较佳在pH8.0左右，具体记不清了，而在偏酸性环境下显色会较浅，按照公式计算浓度会低。如果有条件还是要用液相比较准确，如果条件不允许可以尽量避免上述条件的不一致，采用液相定量后 的工作标准品做标准曲线，尽量用同样的缓冲液稀释样品，不知道能不能帮助到你。
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7楼2011-09-14 15:28:40
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xhjggl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

mexes(金币+1): 应该不会吧，难道移液枪有问题？ 2011-09-14 16:47:15
那就是在做BSA梯度稀释时误差比较大
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8楼2011-09-14 15:29:45
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