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shikongsama

铁虫 (小有名气)

[求助] 抗原包被问题,急

小弟最近在做抗原包被的实验,但有些问题还是不清楚,希望各位大侠帮帮忙
因为我用的抗原是合成的多肽,与聚苯乙烯的板子(固相载体)结合能力不好,所以需要借助其他的非相关蛋白来偶联间接固定到板子上,如BSA牛血清蛋白质

我想问的是抗原和BSA怎么个偶联法啊,实验不走是怎么样的谢谢啊

如果更清楚点的,抗原和BSA偶联浓度比例是多少

谢谢谢谢
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韬光养晦
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limichuan

金虫 (正式写手)

免疫学实验超人qq:858200882

具体我也不懂,没包过小肽,来凑凑热闹!
本公司专业从事蛋白纯化,抗体制备等免疫实验技术服务。欢迎咨询qq:858200882
3楼2011-09-06 16:59:35
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查看全部 6 个回答

rhy1027

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 感谢交流~祝顺利! 2011-09-06 13:47:30
silicare(BioEPI+1): 2011-09-08 10:26:30
shikongsama(金币+1): 2011-09-13 09:30:53
你可以先用Strepavidin(链霉亲和素)包板,Block以后加上Biotin label的抗原(也就是你上面说的多肽)。
至于biotin标记,也很简单,随便google一下,到处都是Protocol的。去除多余的biotin可用脱盐柱或者透析法(biotin非常小,不到1KD)就行。
祝你实验顺利!
2楼2011-09-06 13:16:14
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恒星年

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

用BSA可能不是最好的选择吧,用biotin标记后再包被在亲和素板上吧,有专门成套的试剂盒可用,用起来也挺方便
4楼2011-09-08 09:49:23
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shikongsama

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 恒星年 at 2011-09-08 09:49:23:
用BSA可能不是最好的选择吧,用biotin标记后再包被在亲和素板上吧,有专门成套的试剂盒可用,用起来也挺方便

有什么试剂盒,您帮我推荐下吧

我也想越简单越好操作的比较好

谢谢 呵呵
韬光养晦
5楼2011-09-13 09:29:52
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