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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 植物基因表达分析
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tdong06

木虫 (正式写手)

[求助] 植物基因表达分析

我是想看下植物基因的表达情况，现在做好了RT-PCR，标准曲线应该怎么做才合理呢？是要将做RT-PCR的几个样的CDNA混合好进行稀释梯度，然后再做每个基因的标准曲线，还是应该每个样做一个标准曲线呢？还有就是得到了CT值之后，如何来做标准曲线？请各位赐教！不胜感激！
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1楼 2011-09-05 19:15:57
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wansanlian

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我也想做，但是一直都不懂啊。如果你知道了也麻烦告诉我下~呵呵~
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乱花渐欲迷人眼
2楼2011-09-06 09:51:10
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根
★
西瓜(金币+1): 斑竹很热心哈 2011-09-07 17:21:15
引用回帖:
2楼: Originally posted by wansanlian at 2011-09-06 09:51:10:
我也想做，但是一直都不懂啊。如果你知道了也麻烦告诉我下~呵呵~

http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3234286&fpage=1
到里面找找
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真相是最大的奢侈品
3楼2011-09-06 09:54:43
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tdong06

木虫 (正式写手)
好吧，我摸的一阵，现在有点头绪，但是还没有到能教人的地步啊。完全搞清楚了告诉你啊。留个邮箱吧。
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4楼2011-09-06 22:30:23
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wywqjj521

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 欢迎新虫交流 2011-09-07 17:22:23
tdong06(金币+10): 2011-09-07 17:28:02
可以使用荧光定量PCR来做个相对定量实验设计，进行植物基因表达分析。选一个管家基因作为内参，一般植物中选择Actin基因，将你的样品的RNA反转录后，一般按10倍梯度进行稀释，制作标准曲线，内参基因一条标线，每检测一个基因做一条标线，然后结果根据-Delta Delta Ct法进行基因表达水平分析。现在常规的荧光定量软件均可以直接根据荧光信号结果，做出相应的图。
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5楼2011-09-07 14:48:25
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