应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 急救
71/1返回列表
查看: 992  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

ghost202

铜虫 (正式写手)

[求助] 急救

请求做过real-time pcr的大侠：

      现在我正在做real-time pcr，可是每次结果都很郁闷，我们用的板都是横条有8个孔，每次我加完样，盖上塑料片后，稍微离心，让溶液全部离到底部。可是出过结果的时候，板的前面两个，和最后两个（我每次都是重复两次试验，即前面两个和后面两个均为同一个样做的重复）同样地样跑出来的结果相差很大。但是其他孔同样地样做的重复结果很接近。我不知道为什么？

    我实验室就我一个人有这个问题出现，有一个师兄推荐先加模板，模板加到管底，再加PCR水和SRBY染料，不需要离心。可是结果还是前两个和最后两个重复性不好，其他的没问题。


请求高人啊，谢谢谢谢！！！！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2011-09-02 23:17:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ghost202

铜虫 (正式写手)
西瓜: 点击你的帖子下方那排按钮里面的“编辑”。就在“通知版主处理”的左边。 2011-09-04 19:02:22
怎么编辑啊？？？
最主要就是问怎么可以让real-time pcr 重复性好一些》？谢谢
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-09-03 18:31:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lixg

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

ghost202(金币+5): 有点意思 2011-09-03 22:13:57
你的实验设计有问题：应该每个样做三个重复试验。
赞一下 回复此楼
3楼2011-09-03 18:47:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ghost202

铜虫 (正式写手)
dhd997: 你可以引用回复，这样可以给他一个提示，方便他及时看到，单纯跟帖，他可能不知道你继续提问了啊 2011-09-04 09:48:16
三个重复和两个重复有什么不一样呢？
假如三个重复里面有两个不一样，可能是什么问题呢？
谢谢
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-09-03 20:57:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lixg

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
ghost202(金币+5): 谢谢哦 2011-09-04 09:22:08
dhd997(金币+3): good 2011-09-04 09:48:32
ghost202(金币+2): 2011-12-01 09:14:05
三个重复就是每个样品做三个管，再者一定要离心，有那种离心排管的小型离心机，注意观察直到PCR混合液中没有气泡才行。通常我们是最后加模板，加完后看一下，枪头绝对不能有可见的残留。注意了这些问题后应该就可以了。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-09-04 08:35:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ghost202

铜虫 (正式写手)
★
西瓜(金币+1): 鼓励反馈哦。下次小心哈~ 2011-09-04 19:02:54
亲爱的战友们，问题发现了。。。。。
我为了记好每个样品加在那里，在第一个和最后一个盖子上都做了标记，所以可能荧光就照不到，所以我第一个和最后一个的值就偏小了。

谢谢大家，希望大家接受我的教训！
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2011-09-04 15:41:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ghost202

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ghost202 at 2011-09-03 20:57:28:
三个重复和两个重复有什么不一样呢？
假如三个重复里面有两个不一样，可能是什么问题呢？
谢谢

问题发现了，谢谢你哦
赞一下 回复此楼
7楼2011-09-04 15:43:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ghost202 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +3 a089 2026-08-26 4/200 2026-08-27 08:25 by ZJTJZ
[基金申请] 基金不中，共勉 +6 eulota 2026-08-26 6/300 2026-08-27 08:00 by zzuzxg
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 科研孤儿太难了 +21 我4大白菜 2026-08-20 22/1100 2026-08-26 11:29 by nlgza
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +4 叶九微 2026-08-26 4/200 2026-08-26 10:52 by xiacongxu
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 22/1100 2026-08-25 15:36 by 医学老男孩
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭