24小时热门版块排行榜    

查看: 7764  |  回复: 15
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

Diacetyl

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+5, MolEPI+1): 再接再厉、 2011-09-02 07:00:58
friya0910(金币+2): 2011-09-04 14:59:15
最近准备做pET系统的表达,查了一些资料。发现pET的诱导表达有两种情况:①监测OD值,0.5~0.6时添加IPTG的诱导,②使用自诱导培养基。 关于自诱导培养基,你可以看一下这个帖子:”PET系统蛋白表达自动诱导培养基、大幅度提高产量“,在很多网站上有转载。
对于你的问题,这篇帖子中有描述:【但为了解决表达型质粒的自发诱导的问题(就是不加诱导剂,菌液摇到饱和时总有目的蛋白自动表达的问题,这也是有毒蛋白不能表达的原因),他彻底研究了培养基的每一种组分,最后发现是胰蛋白胨里的少量的乳糖在作怪,他同时又发现了葡萄糖,和氨基酸能抑止乳糖的诱导,在培养基的研究中,他发明了全新的培养基组分,在这种培养基里,菌液的OD值很简单的就能达到5-50左右,在此基础上,他发明了自动诱导系统。】

自诱导培养基,studier文献中的配方感觉太复杂,尤其18 种aa。 我再网上找到了中简单的配方,组成:

Autoclave                                      /1L
      - Phosphate Buffer (pH 7.2)          6g Na2HPO4/3g KH2PO4
      - Tryptone                                        20 g
      - Yeast Extract                                         5 g
      - NaCl                                                 5 g

Filter sterilise
     - 60 % v/v Glycerol                               10 ml
     - 10 % w/v Glucose                                5 ml
     -   8 % w/v Lactose                               25 ml

我要等两天做表达, 对于这个配方不知道你有没有兴趣, 有兴趣的话,可以交流一下此配方的 表达效果。
8楼2011-09-01 21:08:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 friya0910 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 15/750 2026-09-01 12:23 by icm639
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 5/250 2026-08-31 14:40 by hahaboy
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
请填处理意见