24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 7358  |  回复: 15
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

Diacetyl

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+5, MolEPI+1): 再接再厉、 2011-09-02 07:00:58
friya0910(金币+2): 2011-09-04 14:59:15
最近准备做pET系统的表达,查了一些资料。发现pET的诱导表达有两种情况:①监测OD值,0.5~0.6时添加IPTG的诱导,②使用自诱导培养基。 关于自诱导培养基,你可以看一下这个帖子:”PET系统蛋白表达自动诱导培养基、大幅度提高产量“,在很多网站上有转载。
对于你的问题,这篇帖子中有描述:【但为了解决表达型质粒的自发诱导的问题(就是不加诱导剂,菌液摇到饱和时总有目的蛋白自动表达的问题,这也是有毒蛋白不能表达的原因),他彻底研究了培养基的每一种组分,最后发现是胰蛋白胨里的少量的乳糖在作怪,他同时又发现了葡萄糖,和氨基酸能抑止乳糖的诱导,在培养基的研究中,他发明了全新的培养基组分,在这种培养基里,菌液的OD值很简单的就能达到5-50左右,在此基础上,他发明了自动诱导系统。】

自诱导培养基,studier文献中的配方感觉太复杂,尤其18 种aa。 我再网上找到了中简单的配方,组成:

Autoclave                                      /1L
      - Phosphate Buffer (pH 7.2)          6g Na2HPO4/3g KH2PO4
      - Tryptone                                        20 g
      - Yeast Extract                                         5 g
      - NaCl                                                 5 g

Filter sterilise
     - 60 % v/v Glycerol                               10 ml
     - 10 % w/v Glucose                                5 ml
     -   8 % w/v Lactose                               25 ml

我要等两天做表达, 对于这个配方不知道你有没有兴趣, 有兴趣的话,可以交流一下此配方的 表达效果。
8楼2011-09-01 21:08:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 friya0910 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上5B能上会吗? +4 redcom 2026-03-29 4/200 2026-03-29 17:39 by 最爱编纂辞典
[考研] 材料与化工272求调剂 +12 阿斯蒂芬2004 2026-03-28 12/600 2026-03-29 16:16 by 学员8dgXkO
[考研] 297求调剂 +11 田洪有 2026-03-26 11/550 2026-03-29 13:14 by peike
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +6 崔wj 2026-03-26 6/300 2026-03-29 01:11 by hanserlol
[考研] 一志愿211 初试270分 求调剂 +8 谷雨上岸 2026-03-23 9/450 2026-03-29 01:00 by 我是小康
[考研] 295材料工程专硕求调剂 +7 1428151015 2026-03-27 7/350 2026-03-28 19:58 by S240
[考研] 283求调剂 +7 A child 2026-03-28 7/350 2026-03-28 12:05 by zllcz
[考研] 085600材料与化工调剂 +10 A-哆啦Z梦 2026-03-23 16/800 2026-03-27 15:13 by caszguilin
[考研] 08开头275求调剂 +4 拉谁不重要 2026-03-26 4/200 2026-03-27 14:12 by Delta2012
[考研] 一志愿吉大071010,316分求调剂 +3 xgbiknn 2026-03-27 3/150 2026-03-27 10:36 by guoweigw
[考研] 材料调剂 +8 匹克i 2026-03-23 8/400 2026-03-27 08:11 by hypershenger
[考研] 324求调剂 +8 hanamiko 2026-03-26 10/500 2026-03-27 08:06 by hypershenger
[考研] 325求调剂 +5 李嘉图·S·路 2026-03-23 5/250 2026-03-27 00:42 by wxiongid
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-26 3/150 2026-03-26 19:57 by nihaoar
[考研] 085602化学工程求调剂。 +4 平乐乐乐 2026-03-26 4/200 2026-03-26 17:57 by fmesaito
[考研] 085602 289分求调剂 +8 WWW西西弗斯 2026-03-24 8/400 2026-03-26 16:33 by 不吃魚的貓
[考研] 材料调剂 +3 iwinso 2026-03-23 3/150 2026-03-25 11:29 by greychen00
[考研] 086003食品工程求调剂 +6 淼淼111 2026-03-24 6/300 2026-03-25 10:29 by 3Strings
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
[考研] 335求调剂 +4 yuyu宇 2026-03-23 5/250 2026-03-23 23:49 by Txy@872106
信息提示
请填处理意见