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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » IPTG诱导
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friya0910

新虫 (正式写手)

[求助] IPTG诱导

有没有不加IPTG诱导，也能表达目的蛋白的情况存在啊？我的没加IPTG诱导培养5h的菌好像也表达我的目的蛋白了，怎么回事啊？
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1楼 2011-09-01 18:58:32
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friya0910

新虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 天使托 at 2011-09-01 19:42:54:
其实要确定是不是，你可以不加IPTG表达一下，然后添加不同浓度的IPTG再诱导一下，然后PAGE一下就可以看出来了。。。

恩……我也打算把之前未诱导的培养5h的全菌蛋白跑一下，看看到底是什么情况，如果我未诱导的也能在目的蛋白的位置跑出比较亮的带，这个带还能确定是我的目的条带吗？是不是也有可能是菌的某个蛋白啊？
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7楼2011-09-01 20:18:27
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查看全部 16 个回答

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

friya0910(金币+1): 2011-09-01 19:23:03
如果可以的话那就最好了，不过一般都是要IPTG诱导的。。。
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-09-01 19:20:46
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xbl3688

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
friya0910(金币+1): 2011-09-01 19:31:00
dhd997(金币+3): good 2011-09-02 07:00:33
1、在没有IPTG诱导剂存在的情况下，细菌本身当然还是会表达自身蛋白的，但是量比较低；
2、IPTG是β–半乳糖苷酶的活性诱导物质，在它的诱导下乳糖被催化形成半乳糖，使lac操纵子处于激活状态，从而大量的转录表达目的基因；
3、IPTG对细菌有一定的毒害作用，一般使用浓度为1mM/ml.
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生活的乐趣在于善于发现美，学会欣赏美
4楼2011-09-01 19:28:13
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friya0910

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 天使托 at 2011-09-01 19:20:46:
如果可以的话那就最好了，不过一般都是要IPTG诱导的。。。

http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3538745
上面有我跑的全菌蛋白的图，麻烦您帮我看看，这图能说明我的蛋白表达了吗？这图没跑未加IPTG的菌培养5h的情况，我今天跑的上清和沉淀，发现未加IPTG的菌培养5h后上清中都有我的目的蛋白，于是我就困惑了……等脱完色把图传上来让您帮我看看，成吗？
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5楼2011-09-01 19:30:36
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