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475502411

铜虫 (著名写手)

[求助] 加能量抑制剂CCCP的MIC的实验操作

我最近调查大肠杆菌的外排泵的表达情况,但是做MIC是出现很奇怪的问题,向各位高手咨询一下

一环丙沙星CIP为例:
耐药菌株 CIP+CCCP和CIP的MIC值一样
敏感菌株包括25922 CIP+CCCP的MIC值小于单独CIP的MIC值

和我的预期结果正好是相反的,尤其是25922是指控菌,外排泵不可能被激活, CIP+CCCP和CIP的MIC值应该是不变的

CCCP的配置:
  1.  CCCp用1mol/L的 NaoH溶解后用水定容
  2.CCCP加水后再加1mol/L的 NaoH完全溶解后再定容
这两种方法都试过了,结果是一样的。药物加CCCP后,菌几乎不怎么长
另外,我还单独做了CIP和CCCP的25922的MIC,MIC都很正常
CCCP的终浓度是10微克每毫升
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anglemanfred

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

475502411(金币+5): 2011-10-17 22:41:53
是不是在平板上划得菌时间太久了,或者药放的时间过久?再或者是菌的浓度过低,在恒温培养箱里放的时间过短,在看96孔板的时候不清晰.建议都重新配一遍,放时间长一点.我做的时候就采取这种方法,结果就比原来的号很多.
3楼2011-10-04 14:29:32
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475502411

铜虫 (著名写手)

是什么原因啊?是不是CCCP的终浓度或者CCCP的配置有什么问题?请各位指点
可以朝九晚五,也能浪迹天涯
2楼2011-08-31 22:52:55
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